目的 本研究探讨维康醇诱导小鼠黑色素瘤B16F0细胞凋亡的机制.方法 噻唑蓝(MTT)法检测维康醇对小鼠B16F0细胞增殖的影响;台盼蓝拒染法检测细胞致死率;吖啶橙/溴乙啶(AO/EB)荧光染色法观察细胞凋亡形态;Hoechst 33258染色观察药物处理后细胞形态的变化;流式细胞仪Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡率;Caspase-9/3试剂盒检测半胱氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)和半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的活性;实时荧光定量(Real-Time PCR)法检测Bax、Bcl-2基因表达水平.结果 维康醇能抑制B16F0细胞的恶性增殖,并呈剂量依赖性(P<0.05或P<0.01);细胞致死率也不断上升(P<0.05或P<0.01);在荧光显微镜下发现维康醇作用于B16F0细胞后出现明显的凋亡形态;随着维康醇浓度的增加,细胞凋亡率呈剂量依赖性增长(P<0.05或P<0.01);Caspase-3、Caspase-9 活性逐渐升高(P<0.05或P<0.01);Bax/Bcl-2表达的比率上调(P<0.01).结论 维康醇能够通过抑制B16F0细胞的恶性增殖,最终诱导细胞的凋亡.其机制是通过上调Bax/Bcl-2表达的比率,活化Caspase-9并进一步激活Caspase-3诱导B16F0细胞凋亡.推测维康醇诱导B16F0细胞凋亡是通过线粒体调控的内源通路介导的.
作者：杨帆；孙秋艳；刘亮亮；蒋江涛；赵虹；王文娟；王鹏龙；张波；郑秋生
来源：中国药理学通报 2013 年 29卷 9期
