目的:探讨 SHIP2( SH2 domain containing inositol 5-phosphatase 2)基因转染人胃癌细胞BGC-823后对紫杉醇敏感性的影响。方法流式细胞仪PI单染法检测细胞凋亡率。应用免疫蛋白印迹法( Western blot)检测各组细胞蛋白表达情况。实时荧光定量 PCR ( real-time quantitative PCR, qRT-PCR)分析mRNA的变化水平。将 pCMV6-SHIP2质粒在脂质体介导下转染人胃癌BGC-823细胞,同时以转染空载体和未转染细胞作为对照组。将 GV112-Puromycin空载体和 GV112-Puromycin-Bim ( Bcl-2 interacting mediator of cell death)慢病毒颗粒分别感染 BGC-823细胞,建立稳定细胞株,再将 pCMV6-SHIP2质粒分别转染空载体和稳定干扰Bim表达细胞株。结果与 SGC-7901细胞相比, BGC-823细胞对紫杉醇诱导的凋亡相对不敏感,0.3μmol · L-1紫杉醇诱导BGC-82348 h后细胞凋亡率仅为(25.6±1.6)
作者:葛燕梅;叶艳;张林杰
来源:中国药理学通报 2014 年 5期