目的对人ASPP2重组腺病毒制剂进行质量分析，并针对其关键质量特性建立质控方法。方法采用PCR法对重组腺病毒的载体结构特征基因E2B和目的基因ASPP2进行扩增，琼脂糖电泳进行分子量鉴定；采用UV-SDS 法测定重组腺病毒的病毒颗粒数；采用组织培养半数感染剂量法（TCID50）测定重组腺病毒的感染滴度；采用Western blot法对重组腺病毒感染靶细胞后目的蛋白ASPP2的表达情况进行检测；通过MTT实验观察重组腺病毒对肝癌细胞的生物学效应；采用A549细胞进行重组腺病毒的复制型病毒检测。结果腺病毒载体E2B基因和目的基因ASPP2的鉴定结果与理论值相符；重组腺病毒的病毒颗粒数为每毫升5.6×1012 VP，病毒滴度为每毫升2×1011 IU，比活性为3.5％；病毒感染靶细胞24 h后可检测出ASPP2蛋白的表达；重组腺病毒对肝癌细胞具有生长抑制作用；复制型腺病毒（RCA）水平小于1 RCA／3.0×1010 VP，符合中国食品药品监督管理局（SFDA）的标准。结论建立了人ASPP2重组腺病毒的关键特征的质量控制方法，为该重组腺病毒质量标准的建立及相关应用奠定了基础。
作者：王爽；许坚吉；刘晓霓；陈德喜
来源：中国药理学通报 2016 年 32卷 6期
