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目的 探讨p53凋亡刺激蛋白2(apoptosis stimulating protein2 of p53,ASPP2)调控葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)在N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-nitroarginine methyl ester,L-NAME)诱导胎盘滋养细胞凋亡中的作用,为临床研究妊娠期高血压疾病提供理论依据.方法 体外培养HTR-8/SVneo人胎盘滋养细胞,分为对照组(0μmol·L-1 L-NAME)和L-NAME组(100 μmol·L-1 L-NAME),干预48 h后,分别采用Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术和吖啶橙/溴化乙锭染色,检测胎盘滋养细胞凋亡水平的变化;运用Western blot检测caspase-12、GRP78和ASPP2的蛋白变化;ASPP2干扰腺病毒感染人胎盘滋养细胞后,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ASPP2的mRNA表达水平,Western blot检测GRP78的蛋白表达水平;给予100 μmol·L-1 L-NAME干预48 h后,Western blot和免疫荧光分别检测caspase-12和GRP78的蛋白表达.结果 与对照组相比,L-NAME组胎盘滋养细胞凋亡水平明显增加(P<0.05);吖啶橙染色显示,与对照组相比,L-NAME组细胞多数呈现鲜亮的橙色,晚期凋亡细胞数明显增加;同时caspase-12、GRP78和ASPP2蛋白的表达明显增加(P <0.05,P<0.01);干扰ASPP2后,caspase-12和GRP78蛋白表达明显降低(P<0.05).结论 下调ASPP2可降低GRP78

作者:谢琳;张辉;丁宁;王艳华;吴凯;曹军;王青青;刘昆;张慧萍;姜怡邓

来源:中国药理学通报 2019 年 35卷 6期

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谢琳;张辉;丁宁;王艳华;吴凯;曹军;王青青;刘昆;张慧萍;姜怡邓
来源:
中国药理学通报 2019 年 35卷 6期
标签:
p53凋亡刺激蛋白2 葡萄糖调节蛋白78 N-硝基-L-精氨酸甲酯 胎盘滋养细胞 细胞凋亡 妊娠期高血压疾病
目的 探讨p53凋亡刺激蛋白2(apoptosis stimulating protein2 of p53,ASPP2)调控葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)在N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-nitroarginine methyl ester,L-NAME)诱导胎盘滋养细胞凋亡中的作用,为临床研究妊娠期高血压疾病提供理论依据.方法 体外培养HTR-8/SVneo人胎盘滋养细胞,分为对照组(0μmol·L-1 L-NAME)和L-NAME组(100 μmol·L-1 L-NAME),干预48 h后,分别采用Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术和吖啶橙/溴化乙锭染色,检测胎盘滋养细胞凋亡水平的变化;运用Western blot检测caspase-12、GRP78和ASPP2的蛋白变化;ASPP2干扰腺病毒感染人胎盘滋养细胞后,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ASPP2的mRNA表达水平,Western blot检测GRP78的蛋白表达水平;给予100 μmol·L-1 L-NAME干预48 h后,Western blot和免疫荧光分别检测caspase-12和GRP78的蛋白表达.结果 与对照组相比,L-NAME组胎盘滋养细胞凋亡水平明显增加(P<0.05);吖啶橙染色显示,与对照组相比,L-NAME组细胞多数呈现鲜亮的橙色,晚期凋亡细胞数明显增加;同时caspase-12、GRP78和ASPP2蛋白的表达明显增加(P <0.05,P<0.01);干扰ASPP2后,caspase-12和GRP78蛋白表达明显降低(P<0.05).结论 下调ASPP2可降低GRP78