目的 研究灵芝多糖肽(GLPP)对培养乳大鼠心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的保护作用.方法 用出生1～3d的SD乳大鼠进行心肌细胞原代培养,取培养3～4d的心肌细胞分为正常对照组、H/R组和GLPP给药组(12.5,25,50和100 mg· L-1).MTT法检测细胞存活率;电镜检测细胞形态改变和线粒体损伤;用Annexin V-FITC/PI双标记细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡百分率;以Fluo-3/AM荧光指示剂负载,用激光扫描共聚焦显微镜观察心肌细胞内钙离子荧光强度变化;以活性氧(ROS)敏感的荧光探针2,7-二氢二氯荧光素(DCFH-DA)标记细胞,激光共聚焦显微镜下观察ROS含量变化.结果 与正常对照组比较,H/R组细胞存活率降低(P＜0.05);GLPP 12.5,25,50和100 mg· L-1组细胞存活率与H/R组比较明显增加(P＜0.01).与正常对照组比较,H/R组可见线粒体损伤,GLPP给药组可以减轻线粒体损伤.流式细胞仪检测结果表明,与正常对照组比较,H/R组细胞凋亡率增加(P＜0.01);GLPP组与H/R组比较细胞凋亡率明显减小(P＜0.01).与正常对照组比较,H/R组[Ca2+]i增加,细胞内ROS含量增高(P＜0.01);与H/R组比较,GLPP给药组细胞[Ca2+]i减少,细胞内ROS含量降低(P＜0.01).结论 GLPP对H/R损伤的乳大鼠心肌细胞具有保护作用,其作用机制可能与减少细胞内自由基含量和减轻细胞内钙超负荷有
作者：毛慧慧；游育红
来源：中国药理学与毒理学杂志 2015 年 29卷 3期
