目的 观察碲化镉量子点(CdTe QD)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)线粒体自噬的诱导作用,探讨CdTe QD对血管内皮细胞的毒理特性.方法 原代培养的HUVEC采用免疫荧光法鉴定后与CdTe QD(0.1~100 mg·L-1)共孵育24 h,MTT法检测细胞存活;Mitotracker标记、激光共聚焦显微术观察线粒体断裂情况;JC-1染色、流式细胞术检测CdTe QD对HUVEC线粒体膜电位的影响;Western蛋白印迹法检测线粒体自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3 Ⅰ/Ⅱ (LC3 Ⅰ/Ⅱ)、膜突蛋白样BCL2作用蛋白1(Beclin1)、同源性磷酸酶张力蛋白诱导的激酶1 (PINK1)和动力相关蛋白1(DRP1)水平的变化.结果 经鉴定,原代培养的HUVEC>95%为血管内皮细胞.MTF结果显示,CdTe QD作用于HUVEC24h后,细胞存活率显著下降(P<0.05,P<0.01).激光共聚焦显微术检测发现,CdTe QD导致HUVEC胞内线粒体大量断裂.流式细胞术检测染色结果表明,CdTe QD 0.1,1和10 mg·L-1使HUVEC的线粒体膜电位下降,膜电位较高的HUVEC比例分别由正常对照组的(91.8±0.6)%下降至(90.2±1.1)%,(84.4±0.9)%和(78.1±1.3)%(P<0.05,P<O.01).Western蛋白印迹结果显示,CdTe QD 10 mg· L-1诱导自噬相关蛋白Beclin1,LC3 Ⅱ/LC3 l比值PINK1和DRP1的水平升高(P<0.05,P<0.01),CdTe QD 1 mg·L-1还造成线粒
作者:严明;张云;刘珂舟;孙永红
来源:中国药理学与毒理学杂志 2017 年 31卷 6期