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目的:探讨类叶升麻苷对氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的影响及机制.方法:不同浓度(1,10,100 μmol·L-1)的类叶升麻苷作用于oxLDL诱导的HUVEC细胞,酶联免疫吸附法检测细胞中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽还原酶(GSH-Px)活力,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白印迹(Western blot)法检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)和E1A激活基因阻遏子(CREG)蛋白表达水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测CREG mRNA表达水平.转染CREG过表达载体或CREG小干扰RNA至HUVEC细胞,构建CREG过表达或CREG表达抑制的HUVEC细胞.oxLDL诱导CREG过表达的HUVEC细胞,或类叶升麻苷作用于oxLDL诱导的CREG表达抑制的HUVEC细胞,上述相同方法检测MDA含量、SOD和GSH-Px活力、细胞凋亡率、Bcl-2和Bax蛋白表达.结果:oX-LDL诱导HUVEC细胞后,MDA含量、细胞凋亡率和Bax蛋白水平升高,SOD和GSH-Px活力、Bcl-2蛋白及CREG mRNA和蛋白水平降低(P<0.05).类叶升麻苷或过表达CREG可降低oxLDL诱导的HUVEC细胞MDA含量、凋亡率和Bax蛋白表达,提高SOD和GSH-Px活力及Bcl-2蛋白表达(P<0.05).类叶升麻苷可促进oxLDL诱导的HUVEC细胞CREG mRNA和蛋白表达(P<0.05),抑制CREG表达降低了类叶升麻苷对oxLD

作者:张振丽;任启正;孟祥智;高纪林

来源:中国药师 2020 年 23卷 9期

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作者:
张振丽;任启正;孟祥智;高纪林
来源:
中国药师 2020 年 23卷 9期
标签:
类叶升麻苷 E1A激活基因阻遏子 人脐静脉内皮细胞 氧化应激 细胞凋亡
目的:探讨类叶升麻苷对氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的影响及机制.方法:不同浓度(1,10,100 μmol·L-1)的类叶升麻苷作用于oxLDL诱导的HUVEC细胞,酶联免疫吸附法检测细胞中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽还原酶(GSH-Px)活力,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白印迹(Western blot)法检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)和E1A激活基因阻遏子(CREG)蛋白表达水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测CREG mRNA表达水平.转染CREG过表达载体或CREG小干扰RNA至HUVEC细胞,构建CREG过表达或CREG表达抑制的HUVEC细胞.oxLDL诱导CREG过表达的HUVEC细胞,或类叶升麻苷作用于oxLDL诱导的CREG表达抑制的HUVEC细胞,上述相同方法检测MDA含量、SOD和GSH-Px活力、细胞凋亡率、Bcl-2和Bax蛋白表达.结果:oX-LDL诱导HUVEC细胞后,MDA含量、细胞凋亡率和Bax蛋白水平升高,SOD和GSH-Px活力、Bcl-2蛋白及CREG mRNA和蛋白水平降低(P<0.05).类叶升麻苷或过表达CREG可降低oxLDL诱导的HUVEC细胞MDA含量、凋亡率和Bax蛋白表达,提高SOD和GSH-Px活力及Bcl-2蛋白表达(P<0.05).类叶升麻苷可促进oxLDL诱导的HUVEC细胞CREG mRNA和蛋白表达(P<0.05),抑制CREG表达降低了类叶升麻苷对oxLD