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目的:探究绿原酸(CGA)对脂多糖(LPS)诱导的小胶质细胞神经炎症损伤及核因子KB(NF-KB)/Nod样受体家族含pyrin结构域蛋白3(NLRP3)炎性体通路的影响.方法:培养小胶质细胞BV2,3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测不同浓度(0,1,2,4,8 mmol·L-1)CGA对BV2细胞活力的影响;再次培养BV2细胞,依次分为对照(Control)组、LPS组、脂多糖和药物溶剂对照[LPS+二甲亚砜(DMSO)]、脂多糖和阳性药物对照(LPS+Positive)组以及脂多糖和绿原酸处理(LPS+CGA)组.免疫荧光法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素(IL)-1β表达情况;ELISA法检测TNF-α、IL-iβ、IL-6、IL-10、IL-12和诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)含量;免疫印迹分析NF-κB/NLRP3炎性体通路和凋亡相关蛋白水平;流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果:与CGA 0 mmol·L-1比较,CGA 1,2,4 mmol·L-1对BV2细胞增殖活力的影响无统计学意义(P>0.05),CGA 8 mmol·L-1 显著降低BV2细胞增殖活力(P<0.05).LPS诱导后细胞凋亡率升高,细胞上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-12和iNOS分泌量增多,IL-10分泌量减少,细胞中NF-κB p65、磷酸化NF-κB抑制蛋白(p-IκBα)、NLRP3、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(Caspase-1)和B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)蛋白

作者:段松堂;卢威;喻巍;左姗姗

来源:中国药师 2022 年 25卷 5期

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作者:
段松堂;卢威;喻巍;左姗姗
来源:
中国药师 2022 年 25卷 5期
标签:
绿原酸 脂多糖 小胶质细胞 神经炎症损伤 核因子KB/Nod样受体家族含pyrin结构域蛋白3
目的:探究绿原酸(CGA)对脂多糖(LPS)诱导的小胶质细胞神经炎症损伤及核因子KB(NF-KB)/Nod样受体家族含pyrin结构域蛋白3(NLRP3)炎性体通路的影响.方法:培养小胶质细胞BV2,3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测不同浓度(0,1,2,4,8 mmol·L-1)CGA对BV2细胞活力的影响;再次培养BV2细胞,依次分为对照(Control)组、LPS组、脂多糖和药物溶剂对照[LPS+二甲亚砜(DMSO)]、脂多糖和阳性药物对照(LPS+Positive)组以及脂多糖和绿原酸处理(LPS+CGA)组.免疫荧光法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素(IL)-1β表达情况;ELISA法检测TNF-α、IL-iβ、IL-6、IL-10、IL-12和诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)含量;免疫印迹分析NF-κB/NLRP3炎性体通路和凋亡相关蛋白水平;流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果:与CGA 0 mmol·L-1比较,CGA 1,2,4 mmol·L-1对BV2细胞增殖活力的影响无统计学意义(P>0.05),CGA 8 mmol·L-1 显著降低BV2细胞增殖活力(P<0.05).LPS诱导后细胞凋亡率升高,细胞上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-12和iNOS分泌量增多,IL-10分泌量减少,细胞中NF-κB p65、磷酸化NF-κB抑制蛋白(p-IκBα)、NLRP3、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(Caspase-1)和B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)蛋白