目的对谷氨酸脱羧酶抗体(GAD-Ab)、蛋白酪氨酸磷酸酶抗体(IA-2A)、胰岛素自身抗体(IAA)检测条件进行优化分析,使之更好地在临床上推广应用.方法采用我所自建的放射配体检测法,对抗原抗体的孵育方式与时间、缓冲液pH值与洗涤次数、以及离心机类型选择进行优化分析,并通过参加国际糖尿病免疫学会(IDS)第3次糖尿病自身抗体标准化检测方法评估(DASP 2003),以及与国内商品化放射免疫试剂盒比较,评价优化后方法的灵敏度与特异性.结果优化后的检测条件为:采用缓慢旋转孵育的方式使GAD-Ab、IA-2A抗原与血清孵育24h,IAA孵育72h,采用pH 7.2~7.4的TBST缓冲液对GAD-Ab 、IA-2A沉淀复合物洗涤4次,对IAA沉淀复合物洗涤5次,以及采用水平转头低温离心机;DASP 2003结果回报显示,检测条件优化后GAD-Ab灵敏度82
作者:颜湘;周智广;黄干;李霞;王建平;杨琳
来源:中国医师杂志 2004 年 6卷 6期