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目的 构建靶XIAP的siRNA表达载体,研究其对Hep3B细胞中XIAP表达的影响.方法 根据siRNA设计原则,设计并合成三段XIAP的siRNA序列,克隆到pRNAT-U6.1/Neo质粒构建重组质粒;经序列分析确认质粒构建成功后,将重组质粒转染入人肝癌细胞Hep3B,通过RT-PCR、Western blot和免疫组化分析XIAP的表达.结果 重组质粒pRNAT-U6.1/Neo-XIAP经过基因序列分析,siRNA片段成功插入,转染不同siRNA XIAP质粒均可使XIAP的翻译和蛋白表达水平不同程度的降低.结论 成功构建并筛选出靶向XIAP基因的siRNA表达载体,为进一步研究XIAP在调控肝癌细胞凋亡方面的作用奠定了基础.

作者:黄维亮;谢元林;陈军;苏先狮

来源:中国医师杂志 2012 年 14卷 7期

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作者:
黄维亮;谢元林;陈军;苏先狮
来源:
中国医师杂志 2012 年 14卷 7期
标签:
X连锁凋亡抑制蛋白质/遗传学 RNA,小分子干扰 质粒 遗传载体 X-linked inhibitor of apoptosis protein/genetics RNA,small interfering Plasmids Genetic vectors
目的 构建靶XIAP的siRNA表达载体,研究其对Hep3B细胞中XIAP表达的影响.方法 根据siRNA设计原则,设计并合成三段XIAP的siRNA序列,克隆到pRNAT-U6.1/Neo质粒构建重组质粒;经序列分析确认质粒构建成功后,将重组质粒转染入人肝癌细胞Hep3B,通过RT-PCR、Western blot和免疫组化分析XIAP的表达.结果 重组质粒pRNAT-U6.1/Neo-XIAP经过基因序列分析,siRNA片段成功插入,转染不同siRNA XIAP质粒均可使XIAP的翻译和蛋白表达水平不同程度的降低.结论 成功构建并筛选出靶向XIAP基因的siRNA表达载体,为进一步研究XIAP在调控肝癌细胞凋亡方面的作用奠定了基础.