目的:研究索拉菲尼(Sorafenib)诱导的自噬在肝癌细胞凋亡中的作用。方法:体外培养肝癌细胞Huh7和 LH86细胞株。分为对照组、Sorafenib 处理组、Bafilomycin 处理组、Sorafenib + Bafilomycin 处理组。将构建的质粒表达载体 pEGFP - N1- LC3分别转染 Huh7和 LH86细胞株,用索拉菲尼或者索拉菲尼加 Bafilo-mycin 同时处理细胞,通过荧光显微镜观察对照组和处理组细胞内细胞自噬小体形成情况。免疫印迹(West-ern blot)方法检测细胞自噬作用标志蛋白 LC3以及细胞凋亡蛋白 Caspase 3切割条带在各组中的表达, Heochst 33342染料对各组细胞核进行染色,以评估细胞自噬作用对索拉菲尼诱导细胞凋亡的影响。结果:在荧光显微镜下,可以观察到 Sorafenib 能够显著诱导两种肝癌细胞株发生自噬作用。抑制剂 Balfilomycin 能够显著抑制 Sorafenib 诱导的自噬作用。Balfilomycin 抑制自噬能够显著增强 Sorafenib 诱导的细胞凋亡。结论:Sorafenib 能够诱导肝癌细胞产生自噬作用。这种自噬作用在 Sorafenib 诱导的肝癌细胞凋亡中起到负调控作用。
作者:赵相轩;任莹;温锋;孙巍;梁宏元;赵罡;戴朝霞;卢再鸣
来源:现代肿瘤医学 2016 年 24卷 10期