目的 观察人松弛素(RLX)对高糖培养人肾小球系膜细胞分泌细胞外基质的影响,初步探讨其可能作用机制.方法 将人肾小球系膜细胞株分组:正常糖组:含5.5 mmol/L葡萄糖;高糖组:含30 mmol/L葡萄糖;松弛素干预组:高糖(30 mmol/L葡萄糖)+松弛素(10 ng/ml);α-平滑肌动蛋白(α-SMA)的检测增加TGF-β1阳性对照组,即5.5 mmol/L葡萄糖+TGF-β1(5μg/L).CCK-8法检测松弛素对系膜细胞增殖的影响,ELISA法检测细胞上清中Ⅳ型胶原(ColⅣ)、纤连蛋白(FN)的表达.qPCR检测系膜细胞TGF-β1 mRNA表达.免疫印迹技术(Western blot)检测α-SMA表达,确定肾小球系膜细胞表型转化情况.结果 松弛素对正常糖组及高糖组系膜细胞活力均未发现有影响;与正常糖组相比,高糖组各时间点肾系膜细胞分泌ColⅣ、FN显著增加,48 h尤为明显(57.28±0.59 vs 41.85 ±0.03、56.52±0.88 vs 33.80±0.24,P<0.01),α-SMA表达增加(P<0.05).与高糖组比较,松弛素干预组ColⅣ、FN表达在48 h下降最为明显(47.08±0.03 vs 57.28±0.59、36.16±0.52 vs 56.52±0.88,P<0.01),α-SMA表达减少(P<0.01),TGF-β1 mRNA表达下降(P<0.01).结论 松弛素能抑制高糖培养的系膜细胞分泌细胞外基质,部分作用机制是通过抑制细胞表型转分化及抑制TGF-β1基因表达,具有抗纤
作者:谢祥成;费晓;王鸣;徐群红;杨秀;邱冬豪
来源:中国医师杂志 2015 年 17卷 4期