目的 构建NKX3.1真核表达载体,探讨NKX3.1的基因定位以及其对前列腺癌细胞株PC3细胞周期和凋亡的影响.方法 利用PCR技术从正常人前列腺组织中扩增NKX3.1全长读码框(ORF),并将其克隆到T载体.以该载体为模板,将NKX3.1克隆到真核细胞高效表达载体pcDNA3.1(+)和pEGFP C1,转染入PC3细胞株并观察NKX3.1在细胞内的定位,采用流式细胞术检测细胞周期和凋亡的情况.结果 本实验成功构建了NKX3.1真核表达载体.转染NKX3.1 inpEGFP C1的荧光主要在细胞核表达,而转染pEGFP C1的荧光则胞浆和胞核均有表达.与转染pcD-NA3.1空载体的PC3细胞株比较,转染NKX3.1的PC3细胞株细胞周期没有明显改变(P＞0.05),但早期凋亡明显增加(P＜0.01).结论 本实验在成功构建了NKX3.1真核表达载体的基础上,证明了NKX3.1是一种胞核蛋白,它不影响细胞周期,但是具有一定促进早期凋亡的作用.
作者：陈俊丰；马琪；王平；吕秀依；程跃；陈昭典
来源：中国医师杂志 2016 年 18卷 11期
