目的:探讨miRNA-296-5p介导第10号染色体缺失的磷酸酶张力蛋白同源物/磷脂酰肌醇-3激酶/丝氨酸蛋白激酶(PTEN/PI3K/AKT)信号通路发挥抑制神经细胞SK-N-SH中肠道病毒71型(EV71)病毒复制的作用机制。方法:收集临床EV71病毒感染手足口病患儿及正常体检儿的血清样本,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测两组儿童血清炎症因子降钙素原(PCT)、CRP、TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-13的表达变化。取对数生长期经EV71病毒感染的人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞,设置对照组、miRNA-296-5p mimic组和miRNA-296-5p inhibitor组,根据Lipofectamine
? 2000?细胞转染试剂进行转染。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)法观察三组细胞中EV71-VP1病毒基因mRNA和蛋白以及PTEN/PI3K/AKT信号通路相关分子表达。
结果:ELISA检测结果表明EV71病毒感染手足口病患儿血清炎症因子PCT、CRP、TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-13的水平明显高于正常体检儿(
P<0.05)。qRT-RCR和Western blot结果显示EV71病毒感染后神经细胞SK-N-SH中miRNA-296-5p和PTEN的mRNA和蛋白水平明显降低,而EV71-VP1和PTEN/PI3K/AKT信号通路相关分子的mRNA和蛋白水平明显升高(
P<0.05);miRNA-296-5p mimic组中PTEN表达明显升高,同时
作者:周海银;陈艳英;隆彩霞;罗兰;刘萍萍;赵小平;肖政辉;仇君
来源:中国医师杂志 2020 年 22卷 5期