目的:观察微小RNA(miR)-7850在肾癌组织中的表达,探讨miR-7850对肾癌细胞增殖和迁移的影响以及对丝氨酸蛋白酶抑制剂因子B3(SERPINB3)基因表达的调控作用。方法:实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测肾癌组织和肾癌细胞系中miR-7850的表达。选择miR-7850表达最低的肾癌细胞系,采用Lipofectamine 2000转染试剂分别将阴性对照序列(miR-NC)和miR-7850模拟物转入肾癌细胞,定义为miR-NC组和miR-7850组。qRT-PCR检测转染后肾癌细胞内miR-7850的表达。采用CCK-8法和Transwell实验检测转染后细胞增殖和迁移能力。采用生物信息学技术预测和双荧光素酶报告基因实验验证miR-7850的靶基因。qRT-PCR和Western blot检测转染后肾癌细胞内SERPINB3的表达。结果:与癌旁组织(5.95±0.44)相比,miR-7850在肾癌组织(1.19±0.33)的表达较低(
P<0.01)。与永生化近端肾小管上皮细胞(1.01±0.07)相比,miR-7850在肾癌细胞系的表达较低(
P<0.05),在A498细胞中(0.13±0.01)表达最低(
P<0.01)。miR-7850组细胞内miR-7850的表达(7.46±0.93)较miR-NC组(1.01±0.08)明显增加(
P<0.01),表明转染成功。与miR-NC组相比,miR-7850组细胞增殖能力明显降低(
P<0.05)。miR-NC组和miR-7850组迁移细胞数量
作者:谢芳;黄耿;叶志华;王小英;桂定文
来源:中国医师杂志 2021 年 23卷 5期