目的:探讨VEPH1通过TGF-β信号通路对人皮肤黑色素瘤(CM)细胞的上皮-间质转化(EMT)和增殖的调控作用。方法:体外培养黑色素瘤细胞，将黑色素瘤细胞分别体外转染VEPH1、TGF-β过表达或干扰质粒，或经TGF-β通路抑制剂SB-431542处理后，运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测VEPH1、TGF-β、EMT等相关基因及蛋白表达，以及对CM细胞EMT不同蛋白表达和增殖的影响。结果:qRT-PCR结果显示，VEPH1在人皮肤黑色素瘤B16-BL6、B16和A375细胞中的表达明显低于正常人皮肤细胞(HaCaT)，在A375细胞中表达最低，故选用A375细胞进行后续实验。转染VEPH1过表达质粒或SB-431542处理后，A375细胞中E-钙黏蛋白的mRNA和蛋白表达量显著上升( P<0.05)，TGF-β、Smad4、N-钙黏蛋白和波形蛋白的mRNA和蛋白表达量均显著降低( P<0.05)，细胞增殖显著降低。与VEPH1载体组相比，VEPH1载体+SB-431542组TGF-β、Smad4、N-钙黏蛋白和波形蛋白的mRNA和蛋白表达量均显著降低( P<0.05)，E-钙黏蛋白表达升高，细胞增殖亦显著降低( P<0.05)；转染TGF-β过表达质粒或si-VEPH1质粒后，A375细胞TGF-β、Smad4、波形蛋白和N-钙黏蛋白的mRNA和蛋白表达增加，E-钙黏蛋白的表达减少，细胞增殖

作者：冯浩；章君仪；陈梦娇；彭世雄；唐桦

来源：中国医师杂志 2021 年 23卷 6期