目的 以细胞有丝分裂阻滞剂Nocodazole为诱导物,诱导骨肉瘤MG-63细胞凋亡,并进行生物化学指标的检测.方法 首先,观察1 nmol/L~10 μmol/L递增浓度的Nocodazole对MG-63细胞的作用,然后选取10,50,100,500 nmol/L 4个浓度诱导凋亡,通过噻唑蓝(MTT)比色实验测定细胞生长曲线;流式细胞技术(FCM)分析细胞周期:免疫细胞化学方法检测PLKI表达情况;用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析Nocodazole作用前后MG-63细胞内PLK1基因表达情况.结果 不同浓度Nocodazole作用MG-63细胞24 h后,对细胞增殖的抑制作用呈浓度依赖性增加.流式细胞仪分析结果显示,Nocodazole作用MG-63细胞后,G0/G1期细胞含量降低,S期细胞比例增加,G2/M期细胞比例则明显增加,且随着处理浓度的增加其G2/M期细胞含量逐渐增加,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).Nocodazole作用后,免疫细胞化学检测显示,PLK1表达明显下降.RT-PCR分析显示经Nocodazole作用后的骨肉瘤细胞株MG-63表达PLK1较用药前明显下降.上述结果都有明显的量一效关系.结论 Nocodazole诱导MG-63细胞凋亡、G2/M期阻滞的机制可能是通过抑制PLK1基因的表达实现的.
作者:贾鹏;吕智;刘小丽;冯毅;薛小云
来源:中国药物与临床 2011 年 11卷 2期