目的 探讨破坏中间纤维对体外软骨细胞代谢功能的影响.方法 2个月龄新西兰大白兔双膝关节全层软骨消化为原代软骨细胞,培养3 d贴壁后,分为对照组和实验组,对照组用原代培养基继续培养,实验组在原代培养基中加入中间纤维破坏剂丙烯酰胺(终浓度为2.5 mmol/L).加药后第1、2天利用磷脂酰丝氨酸外翻分析法检测细胞早期凋亡率,第6天用细胞爬片苏木素-伊红(HE)染色观察细胞形态的改变,第3、6、9天用实时定量聚合酶链反应法测定软骨细胞Ⅱ型胶原、糖胺多糖以及基质金属蛋白酶(MMP)-13 mRNA的表达量.结果 实验组在加药后第2天软骨细胞的早期凋亡率高于对照组(P＜0.05);和对照组相比较,实验组在加药后第6天HE染色观察到细胞形态不规则,呈多角形,胞核深染且分裂像增多,细胞基质减少;在加药后第3、6、9天检测到实验组Ⅱ型胶原和糖胺多糖的mRNA表达相对于对照组下降(P＜0.05);在加药后第6、9天MMP-13 mRNA表达显著增加(P＜0.01).结论 中间纤维破坏后可以诱导软骨细胞的早期凋亡,致Ⅱ型胶原和糖胺多糖产生减少,而炎性因子MMP-13表达增多,可能是骨关节炎产生的一个重要环节.
作者：王磊；郭恒；段王平；卫小春
来源：中国药物与临床 2011 年 11卷 7期
