目的 构建CD147干扰质粒,对肝癌细胞7721内源性CD147表达的抑制效果进行检测.方法 设计及构建3对pGenesil- 1-CD 147/shRNA及1对阴性对照干扰质粒,通过测序鉴定.将干扰质粒用LipofectamineTM 2000转染肝癌细胞,通过瞬时转染获得细胞系,实时PCR和蛋白印迹法检测3对干扰质粒、阴性对照质粒的mRNA及蛋白表达水平.结果 实时PCR和蛋白印迹法结果显示干扰质粒pGenesil-1-CD147/shRNA3对肝癌细胞7721内CD147mRNA及蛋白的抑制效果最显著.结论 成功构建了CD 147干扰真核表达载体,筛选出有效干扰质粒,为进一步研究低表达CD147的肝癌细胞7721在肝癌发生发展中的机制提供基础.
作者:李海峰;董红霖;刘继敏;闫盛;胡杰;王玉文;王平;苏磊;辛振磊
来源:中国药物与临床 2012 年 12卷 9期