目的 研究脂肪间充质干细胞(MSC)来源的Exosome对谷氨酸神经损伤的保护作用及可能机制.方法 采用透射电镜和Western blot法检测人脂肪MSC来源的Exosome的特征,ELISA法检测Exosome中主要的细胞因子.用PC12细胞建立谷氨酸神经细胞损伤模型,并分为对照组(未经谷氨酸损伤的细胞)、Glu组(谷氨酸损伤未经其他处理的细胞)、Glu+ Exo组(谷氨酸损伤后用100 ng/ml MSC Exosome处理的细胞)、Glu+Exo+ Akt组(谷氨酸损伤后用MSC Exosome同时加10 μmol/L Akt抑制剂LY294002处理的细胞)、Glu+ Exo+ Erk组(谷氨酸损伤后用MSC Exosome同时加10 μmol/L Erk抑制剂U0126处理的细胞)和Glu+ Exo+ TrkB组(谷氨酸损伤后用MSC Exosome同时加10 μmol/L TrkB抑制剂K252a处理的细胞),MTS法检测各组细胞的存活率并进行比较.结果 透射电镜下可见Exosome为40 ~ 100 nm的小囊泡结构,West-em blot法检测结果显示其可表达0D63、CD81、HSP70和HSP90等特征性蛋白.ELISA检测结果显示Exosome中主要包含的细胞因子为肝细胞生长因子和胰岛素样生长因子,含量分别为9336.49±258.63和58645.50±16014.62;而脑源性神经营养因子、血管内皮生长因子和神经生长因子含量均较低,分别为1928.25±385.47、1136.94±5.99和33.34±9.43.MTS检测结果显示,对
作者:魏俊吉;陈云飞;薛春玲;马百涛;沈雅梅;关健;包新杰;吴昊;韩钦
来源:中国医学科学院学报 2016 年 38卷 1期