目的 探究大鼠脊髓神经元缺氧复氧损伤中钙敏感受体对其凋亡的影响及意义.方法 将新生SD大鼠脊髓神经元随机分为正常对照组、缺氧复氧组、激动剂(GdCl3)组和抑制剂(NPS-2390)组4组.采用95%氮气通入置有细胞培养板的密闭通气盒中15 min,37℃培养箱内培养1h,再用含2% B27、10%胎牛血清的Neurobasol-A液培养细胞24h复制缺氧复氧模型.应用免疫荧光技术鉴定脊髓神经元并观察钙敏感受体的表达定位,Westem blot法检测各组钙敏感受体及凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax、Bcl-2的表达水平,激光共聚焦显微镜测定细胞内游离钙的变化,Tunel法观察各组细胞凋亡情况.结果 缺氧复氧组的钙敏感受体(=5.462,P=0.006)、细胞内游离钙(t=8.573,P=0.001)、细胞凋亡(t =4.899,P=0.008)、Caspase-3(t=5.118,P=0.007)和Bax (t=10.930,P=0.001)表达水平均明显高于对照组,激动剂组的钙敏感受体(t=4.975,P=0.008)、细胞内游离钙(t=4.899,P=0.008)、细胞凋亡(=7.746,P=0.002)、Caspase-3(=4.776,P=0.009)和Bax(t=5.281,P=0.006)表达水平均明显高于缺氧复氧组,抑制剂组的钙敏感受体(=3.674,P=0.021)、细胞内游离钙(t=3.846,P=0.018)、细胞凋亡(=4.281,P=0.013)、Caspase-3(t=3.521,P=0.024)和Bax(t=3.473,P=0.026)表达水平均明显低于缺氧
作者:何炜;孙继芾;蒋润宇;张志坚;陈谦;黄永辉
来源:中国医学科学院学报 2017 年 39卷 5期