目的:以乙酰肝素酶(HPA)基因为靶点,构建短发夹RNA(shRNA)慢病毒表达载体,研究慢病毒携带的shRNA对乳腺癌HPA基因表达的抑制作用.方法:以乳腺癌HPA基因为靶基因,根据RNA干扰(RNAi)序列设计原则,通过构建3对shRNA重组慢病毒的表达载体,转染乳腺癌MDA-MB-231细胞,在体外采用蛋白质印迹(Western blot)法检测HPA基因蛋白表达水平;在体内构建乳腺癌模型,通过免疫组化检测HPA基因蛋白的表达.结果:在体外实验中,HPA-shRNA-1组和HPA-shRNA-2组均有效抑制了人乳腺癌MDA-MB-231细胞HPA的表达.在体内实验中,HPA-shRNA-2组HPA基因蛋白的表达明显低于阴性对照组及空白对照组,HPA-shRNA-2组阳性率与空白对照组比较,差异有统计学意义(x2=12.504,P<0.05).表明在体内实验中HPA-shRNA-2组可以下调HPA基因蛋白表达.结论:以HPA为靶点构建shRNA重组慢病毒载体,体内外实验均能下调乳腺癌HPA基因的表达,可为乳腺癌靶向治疗提供新的靶点.
作者：陈国利；郑志方；张学军；裴天禄；张金光
来源：中国医学装备 2017 年 14卷 6期
