目的 探讨应用靶向VEGF-C的短发夹RNA(shRNA)质粒载体在体外抑制乳腺癌细胞株MCF-7生物学活性的影响.方法 制备携带有绿色荧光蛋白(GFP)报告基因的VEGF-C-shRNA质粒载体,脂质体转染方法转入乳腺癌细胞株MCF-7,通过倒置荧光显微镜及流式细胞术检测细胞的转染效率,RT-PCR及Western blot检测转染细胞内VEGFC mRNA及蛋白的表达变化,MTT法检测细胞增殖抑制率,重组基底膜侵袭实验检测细胞侵袭能力.结果 高效转染入VEGF-C-shRNA的MCF-7细胞VEGF-C mRNA及蛋白表达水平显著下降;VEGF-C ShRNA对MCF-7细胞具有明显的增殖抑制作用,其抑增殖效应呈时间依赖性;VEGF-C-shRNA可抑制乳腺癌细胞MCF-7体外侵袭重组基底膜的能力,与阴性shRNA转染组、空载体组及空白组比较,差异有统计学意义(P<0.05);结论 VEGF-C在乳腺癌增殖、侵袭转移中发挥重要作用,通过RNA干扰技术实现VEGF-C沉默在乳腺癌的基因治疗中具有可行性.
作者:古立诚;肖焕擎;徐波;朱光辉;李书华
来源:中华乳腺病杂志(电子版) 2008 年 2卷 1期