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目的 检测体外培养的人肝细胞癌HepG2,Hep3B细胞和正常肝细胞系QSG7701细胞内环氧酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)的表达,观察环氧酶抑制剂双氯芬酸(diclofenac)对上述细胞增殖的作用,并检测前列腺素E2(PGE2)对双氯芬酸作用的影响,以探讨双氯芬酸抗增殖作用与细胞内COX-2的关系.方法 采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测COX-2 mRNA的表达水平,免疫印迹技术检测细胞内蛋白水平,cell counting kit-8(CCK-8)细胞计数法测定细胞增殖活性.结果 肝细胞癌HepG2和Hep3B细胞均高表达COX-2 mRNA和COX-2蛋白,正常肝细胞系QSG7701微弱表达COX-2.10~200 μmol·L-1的双氯芬酸浓度依赖性地抑制HepG2和Hep3B细胞的增殖(P<0.01),作用72 h的半数抑制浓度(IC50)分别为76.41和35.21 μmol·L-1.双氯芬酸对QSG7701的抑制作用较弱,IC50值为170.23 μmol·L-1.20 μmol·L-1 PGE2与50 μmol·L-1双氯芬酸共同孵育能显著削弱后者抗HepG2和Hep3B细胞增殖的作用(P<0.01).结论 双氯芬酸通过抑制COX-2活性和PGE2的生成,特异性地抑制表达COX-2的肝癌细胞的增殖.

作者:陈娜娜;吴曙光

来源:中国药学杂志 2007 年 42卷 15期

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作者:
陈娜娜;吴曙光
来源:
中国药学杂志 2007 年 42卷 15期
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双氯芬酸 肝细胞癌 细胞增殖 环氧合酶-2 前列腺素E2
目的 检测体外培养的人肝细胞癌HepG2,Hep3B细胞和正常肝细胞系QSG7701细胞内环氧酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)的表达,观察环氧酶抑制剂双氯芬酸(diclofenac)对上述细胞增殖的作用,并检测前列腺素E2(PGE2)对双氯芬酸作用的影响,以探讨双氯芬酸抗增殖作用与细胞内COX-2的关系.方法 采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测COX-2 mRNA的表达水平,免疫印迹技术检测细胞内蛋白水平,cell counting kit-8(CCK-8)细胞计数法测定细胞增殖活性.结果 肝细胞癌HepG2和Hep3B细胞均高表达COX-2 mRNA和COX-2蛋白,正常肝细胞系QSG7701微弱表达COX-2.10~200 μmol·L-1的双氯芬酸浓度依赖性地抑制HepG2和Hep3B细胞的增殖(P<0.01),作用72 h的半数抑制浓度(IC50)分别为76.41和35.21 μmol·L-1.双氯芬酸对QSG7701的抑制作用较弱,IC50值为170.23 μmol·L-1.20 μmol·L-1 PGE2与50 μmol·L-1双氯芬酸共同孵育能显著削弱后者抗HepG2和Hep3B细胞增殖的作用(P<0.01).结论 双氯芬酸通过抑制COX-2活性和PGE2的生成,特异性地抑制表达COX-2的肝癌细胞的增殖.