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目的 克隆金黄色葡萄球菌肠毒素E(SEE)基因,获得重组SEE蛋白(rSEE),并对rSEE进行生物活性分析.方法 通过PCR从金黄色葡萄球菌FRI326菌株基因中得到肠毒素SEE的成熟肽基因,将其克隆至融合表达载体pGEX-4T-1,转化大肠杆菌进行表达并对融合蛋白进行亲和色谱纯化,通过MTT法研究其生物活性.结果 成功构建了SEE的表达载体,并得到高纯度的重组蛋白.MTT法结果表明,rSEE具有良好的促淋巴细胞增殖的能力以及肿瘤细胞的杀伤活性.结论 具超抗原活性和高纯度的rSEE,为进一步研究该蛋白的抗肿瘤机制,构建靶向抗肿瘤融合蛋白奠定了基础.

作者:张伟;潘映秋;陈枢青

来源:中国药学杂志 2008 年 43卷 5期

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作者:
张伟;潘映秋;陈枢青
来源:
中国药学杂志 2008 年 43卷 5期
标签:
金黄色葡萄球菌肠毒素 超抗原 融合表达 生物活性
目的 克隆金黄色葡萄球菌肠毒素E(SEE)基因,获得重组SEE蛋白(rSEE),并对rSEE进行生物活性分析.方法 通过PCR从金黄色葡萄球菌FRI326菌株基因中得到肠毒素SEE的成熟肽基因,将其克隆至融合表达载体pGEX-4T-1,转化大肠杆菌进行表达并对融合蛋白进行亲和色谱纯化,通过MTT法研究其生物活性.结果 成功构建了SEE的表达载体,并得到高纯度的重组蛋白.MTT法结果表明,rSEE具有良好的促淋巴细胞增殖的能力以及肿瘤细胞的杀伤活性.结论 具超抗原活性和高纯度的rSEE,为进一步研究该蛋白的抗肿瘤机制,构建靶向抗肿瘤融合蛋白奠定了基础.