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报道了rhTNFα重组菌发酵条件及高密度、高表达发酵的研究。首先研究了营养成份对其生长和表达的影响,确定了半合成发酵培养基;筛选出了rhTNFα生长和表达的最适宿主菌E.coli YK537;研究了影响高表达的几个关键因素,建立了该类型重组菌的诱导表达条件。结果表明限制发酵过程中乙酸积累、控制在指数生长期进行诱导、持续诱导时间不超过5 h是实现高密度、高表达发酵的关键条件。采用半经验补料流加公式,在NBS BioFlo 3000型5L发酵罐中利用恒溶氧-补料培养批技术,限制甘油浓度在5 g/L,可使E.coli YK537/pSB-TR最终菌体密度和rhTNFα的产量分别达到A600126和8.4 g/L。

作者:李民;徐皓;周逸明;杨如燕;陈常庆

来源:中国医药工业杂志 2000 年 31卷 10期

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作者:
李民;徐皓;周逸明;杨如燕;陈常庆
来源:
中国医药工业杂志 2000 年 31卷 10期
标签:
肿瘤坏死因子 重组大肠杆菌 高密度发酵
报道了rhTNFα重组菌发酵条件及高密度、高表达发酵的研究。首先研究了营养成份对其生长和表达的影响,确定了半合成发酵培养基;筛选出了rhTNFα生长和表达的最适宿主菌E.coli YK537;研究了影响高表达的几个关键因素,建立了该类型重组菌的诱导表达条件。结果表明限制发酵过程中乙酸积累、控制在指数生长期进行诱导、持续诱导时间不超过5 h是实现高密度、高表达发酵的关键条件。采用半经验补料流加公式,在NBS BioFlo 3000型5L发酵罐中利用恒溶氧-补料培养批技术,限制甘油浓度在5 g/L,可使E.coli YK537/pSB-TR最终菌体密度和rhTNFα的产量分别达到A600126和8.4 g/L。