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以毕赤酵母人β干扰素表达体系为研究对象,考察与蛋白酶活性相关的营养和环境因素对外源蛋白hIFNβ-HAS表达/降解的影响.结果表明,pH、谷氨酸和EDTA是显著影响hIFNβ-HAS表达的3个因素.通过响应面分析得到hIFNβ-HAS表达的最优条件为pH 5.5、谷氨酸0.18%、EDTA 12 mmol/L,目的蛋白表达量为24.46 mg/L.发酵终产物的电泳结果表明:条件优化后,hIFNβ-HSA降解带明显变淡,说明营养和环境因素的优化一定程度上抑制了蛋白酶的活性,由此增加了目的蛋白的积累.

作者:张旦旦;窦文芳;许正宏;史劲松

来源:中国医药工业杂志 2012 年 43卷 9期

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作者:
张旦旦;窦文芳;许正宏;史劲松
来源:
中国医药工业杂志 2012 年 43卷 9期
标签:
毕赤酵母 β干扰素 融合蛋白 响应面分析 优化 蛋白酶 酶活性
以毕赤酵母人β干扰素表达体系为研究对象,考察与蛋白酶活性相关的营养和环境因素对外源蛋白hIFNβ-HAS表达/降解的影响.结果表明,pH、谷氨酸和EDTA是显著影响hIFNβ-HAS表达的3个因素.通过响应面分析得到hIFNβ-HAS表达的最优条件为pH 5.5、谷氨酸0.18%、EDTA 12 mmol/L,目的蛋白表达量为24.46 mg/L.发酵终产物的电泳结果表明:条件优化后,hIFNβ-HSA降解带明显变淡,说明营养和环境因素的优化一定程度上抑制了蛋白酶的活性,由此增加了目的蛋白的积累.