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目的:研究结缔组织生长因子-5(CCN5)与肝星状细胞活化的关系及其作用机制.方法:以人肝星状细胞系LX-2为研究对象,以转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激LX-2细胞,Western blot测定CCN5及CCN2表达变化;构建CCN5过表达载体,转染人肝星状细胞LX-2,使CCN5在LX-2中过表达;采用RT-PCR及Western blot测定α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)与Ⅰ型胶原表达变化情况;为进一步研究其作用机制,采用RT-PCR及Western blot对Smad2表达及Smad2磷酸化水平进行测定.结果:正常情况下,LX-2细胞中CCN2表达量远高于CCN5,TGF-β1刺激后CCN2明显增高,而CCN5无变化;与正常对照组和空载体组相比,转染组CCN5在LX-2中成功过表达后,α-SMA及Ⅰ型胶原表达量显著下降(P<0.01);Smad2磷酸化水平显著下降(P<0.01).结论:CCN5具有抑制肝星状细胞活化的作用,与CCN家族另一重要分子CCN2的促纤维化作用截然相反,为肝纤维化的防治提供新的思路.

作者:张承彦;谢鑫;高登升;张春喜

来源:中国应用生理学杂志 2013 年 29卷 5期

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作者:
张承彦;谢鑫;高登升;张春喜
来源:
中国应用生理学杂志 2013 年 29卷 5期
标签:
CCN5 肝星状细胞 肝纤维化 CCN5 hepatic stellate cell hepatic fibrosis
目的:研究结缔组织生长因子-5(CCN5)与肝星状细胞活化的关系及其作用机制.方法:以人肝星状细胞系LX-2为研究对象,以转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激LX-2细胞,Western blot测定CCN5及CCN2表达变化;构建CCN5过表达载体,转染人肝星状细胞LX-2,使CCN5在LX-2中过表达;采用RT-PCR及Western blot测定α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)与Ⅰ型胶原表达变化情况;为进一步研究其作用机制,采用RT-PCR及Western blot对Smad2表达及Smad2磷酸化水平进行测定.结果:正常情况下,LX-2细胞中CCN2表达量远高于CCN5,TGF-β1刺激后CCN2明显增高,而CCN5无变化;与正常对照组和空载体组相比,转染组CCN5在LX-2中成功过表达后,α-SMA及Ⅰ型胶原表达量显著下降(P<0.01);Smad2磷酸化水平显著下降(P<0.01).结论:CCN5具有抑制肝星状细胞活化的作用,与CCN家族另一重要分子CCN2的促纤维化作用截然相反,为肝纤维化的防治提供新的思路.