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目的:探讨巨噬细胞在大鼠肾脏缺血/再灌注损伤过程中的亚型转变及意义.方法:将30只雄性SD大鼠随机分成假手术组(Sham,n=6)和缺血/再灌组(IRI,夹闭肾动脉45 min,n=24).IRI组分别于术后0、6、24和72 h取肾组织,每个时相组6只大鼠.用HE染色观察肾组织损伤程度;免疫组化染色检测细胞增殖核抗原(PCNA)的表达;实时定量RT-PCR检测巨噬细胞移动抑制因子(MIF) mRNA的表达;免疫组织荧光染色检测MIF、单核巨噬细胞趋化蛋白-1(MCP-1)以及活化巨噬细胞标志物CD68的表达,流式细胞分析检测巨噬细胞M1和M2亚型的分布特征.结果:病理结果显示大鼠肾局部损伤情况和炎症细胞浸润程度在24h时最为严重,之后逐渐恢复.PCNA在再灌后表达明显增加,6h达峰值,72 h表达下降.相比于正常组,再灌组大鼠肾组织中MIF的mRNA和蛋白表达明显升高;MCP-1表达则在6h达峰值,随后下降;而CD68阳性的巨噬细胞数量明显增加,24h达峰值,72 h表达下降.更进一步研究发现缺血/再灌注6h时,M1亚型分布达最高值;之后随着缺血/再灌注时间延长,M1亚群相对含量开始下调,M2随之升高.结论:在肾脏缺血/再灌注早期,M1巨噬细胞介导的组织损伤发挥主要作用,随后M2型表达逐渐上调,并通过促进细胞增殖修复肾组织损伤.

作者:林成成;陆红;吴莲凤;梁勇;陈必成;白永恒

来源:中国应用生理学杂志 2016 年 32卷 4期

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作者:
林成成;陆红;吴莲凤;梁勇;陈必成;白永恒
来源:
中国应用生理学杂志 2016 年 32卷 4期
标签:
肾脏 缺血/再灌注 巨噬细胞 损伤修复 kidney ischemia/reperfusion macrophage injury and recovery
目的:探讨巨噬细胞在大鼠肾脏缺血/再灌注损伤过程中的亚型转变及意义.方法:将30只雄性SD大鼠随机分成假手术组(Sham,n=6)和缺血/再灌组(IRI,夹闭肾动脉45 min,n=24).IRI组分别于术后0、6、24和72 h取肾组织,每个时相组6只大鼠.用HE染色观察肾组织损伤程度;免疫组化染色检测细胞增殖核抗原(PCNA)的表达;实时定量RT-PCR检测巨噬细胞移动抑制因子(MIF) mRNA的表达;免疫组织荧光染色检测MIF、单核巨噬细胞趋化蛋白-1(MCP-1)以及活化巨噬细胞标志物CD68的表达,流式细胞分析检测巨噬细胞M1和M2亚型的分布特征.结果:病理结果显示大鼠肾局部损伤情况和炎症细胞浸润程度在24h时最为严重,之后逐渐恢复.PCNA在再灌后表达明显增加,6h达峰值,72 h表达下降.相比于正常组,再灌组大鼠肾组织中MIF的mRNA和蛋白表达明显升高;MCP-1表达则在6h达峰值,随后下降;而CD68阳性的巨噬细胞数量明显增加,24h达峰值,72 h表达下降.更进一步研究发现缺血/再灌注6h时,M1亚型分布达最高值;之后随着缺血/再灌注时间延长,M1亚群相对含量开始下调,M2随之升高.结论:在肾脏缺血/再灌注早期,M1巨噬细胞介导的组织损伤发挥主要作用,随后M2型表达逐渐上调,并通过促进细胞增殖修复肾组织损伤.