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目的 研究Notch1在寻常型银屑病皮损中的表达及对体外培养永生化人皮肤角质形成细胞(HaCaT)增殖、凋亡的影响,探究其可能存在的发生机制.方法 收集30例寻常型银屑病患者病患处的皮肤组织和30名健康人的皮肤组织,应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白印迹技术(Western)测定皮肤组织Notch1、Jagged1 mRNA和蛋白表达量;将HaCaT细胞随机分为激活剂组(2μg/ml Jagged1-Fc融合蛋白)、抑制剂组(20μmol/L DAPT)和空白对照组,体外培养.用细胞计数(CCK-8)法检测HaCaT细胞增殖,用流式细胞术测定人HaCaT细胞的凋亡情况,用Western印迹技术检测HaCaT细胞内凋亡蛋白(Bcl-2、Bax)、involucrin、keratin1蛋白表达.结果 寻常型银屑病病人病患处的表皮组织中Jagged1、Notch1 mRNA及蛋白表达量均高于健康人皮肤组织(t值分别为4.26、4.78和5.12、4.23,P值均<0.05).激活剂组、抑制剂组和空白对照组HaCaT细胞增殖抑制率在24、48和72 h中差异具有统计学意义(F值分别为123.45、219.67和289.16,P值均<0.05).激活剂组(5.31%±1.21%)、抑制剂组(26.33% ±3.57%)和空白对照组(13.17% ±2.18%)HaCaT细胞的凋亡率差异有统计学意义(F=13.96,P<0.05).激活剂组、抑制剂组与空白对照组HaCaT细胞Bax和Bcl-2蛋白表达分别为(1.28±0.1

作者:苏华振;魏明

来源:中国医药生物技术 2019 年 14卷 5期

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作者:
苏华振;魏明
来源:
中国医药生物技术 2019 年 14卷 5期
标签:
寻常型,银屑病 细胞增殖 角质形成细胞 细胞凋亡 Notch信号通路
目的 研究Notch1在寻常型银屑病皮损中的表达及对体外培养永生化人皮肤角质形成细胞(HaCaT)增殖、凋亡的影响,探究其可能存在的发生机制.方法 收集30例寻常型银屑病患者病患处的皮肤组织和30名健康人的皮肤组织,应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白印迹技术(Western)测定皮肤组织Notch1、Jagged1 mRNA和蛋白表达量;将HaCaT细胞随机分为激活剂组(2μg/ml Jagged1-Fc融合蛋白)、抑制剂组(20μmol/L DAPT)和空白对照组,体外培养.用细胞计数(CCK-8)法检测HaCaT细胞增殖,用流式细胞术测定人HaCaT细胞的凋亡情况,用Western印迹技术检测HaCaT细胞内凋亡蛋白(Bcl-2、Bax)、involucrin、keratin1蛋白表达.结果 寻常型银屑病病人病患处的表皮组织中Jagged1、Notch1 mRNA及蛋白表达量均高于健康人皮肤组织(t值分别为4.26、4.78和5.12、4.23,P值均<0.05).激活剂组、抑制剂组和空白对照组HaCaT细胞增殖抑制率在24、48和72 h中差异具有统计学意义(F值分别为123.45、219.67和289.16,P值均<0.05).激活剂组(5.31%±1.21%)、抑制剂组(26.33% ±3.57%)和空白对照组(13.17% ±2.18%)HaCaT细胞的凋亡率差异有统计学意义(F=13.96,P<0.05).激活剂组、抑制剂组与空白对照组HaCaT细胞Bax和Bcl-2蛋白表达分别为(1.28±0.1