目的:探讨LRP6受体胞内区赖氨酸位点突变对经典Wnt信号通路影响.方法:构建胞内区3个赖氨酸位点(K8R、K48R及K82R)同时突变的突变型LRP6受体,瞬时转染HEK293细胞,运用荧光素酶报告基因技术分析其对β-catenin/TCF转录活性影响;同时运用谷胱甘肽转移酶-E-钙粘蛋白(GST-E-cadherin)结合法提取胞浆游离β-连环蛋白(β-catenin),Western blot法测定总β-连环蛋白、胞浆游离β-连环蛋白、低密度脂蛋白相关受体-6(LRP6)及磷酸化LRP6(p-LRP6)蛋白水平.结果:和转染空白质粒PcDNA3比较,转染LRP6增强TOPflash活性593倍(P＜0.05),提高胞浆游离β-catenin水平126.3％;而转染赖氨酸突变的LRP6将进一步增强TOPflash活性,达2 989倍(P＜0.05),胞浆游离β-catenin水平提高580.5％;和转染未突变LRP6相比,转染胞内区赖氨酸突变LRP6受体激活Wnt信号通路作用更强.结论:LRP6胞内区赖氨酸位点在LRP6参与Wnt信号通路活化过程中可能具有重要作用.
作者：林翠鸿；柯蒙；黄品芳；王长连
来源：中国医院药学杂志 2015 年 35卷 16期
