目的:t(9;22)(q34;q11)突变导致的BCR-ABL融合基因及其编码的融合蛋白在慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)发病中发挥重要作用.本研究观察可与BCR-ABL融合蛋白N端寡聚化区域(Oligomerization doraain,OD)特异性结合的嵌合泛素连接酶E3 β-TrCP的β-TrCP-OD-HA的重组腺病毒载体,经泛素-蛋白酶体途径降解BCR-ABL融合蛋白对白血病K562细胞增殖的影响.方法:HEK293细胞扩增野生型Ad5β-TrCP-OD-HA、突变型Ad5AF-TrCP-OD-HA及空载Ad5GFP重组腺病毒栽体,感染K562细胞.以未感染K562细胞作空白对照,流式细胞术检测重组腺病毒载体感染效率,Western blot检测外源性重组蛋白和BCR-ABL融合蛋白的表达,通过细胞增殖曲线、甲基纤维素集落形成试验、细胞周期检测β-TrCP-OD-HA对K562细胞增殖的影响.结果:成功建立携β-TrCP-OD-HA重组腺病毒载体的K562细胞株,重组腺病毒载体感染效率达66.4
作者:田文君;罗红伟;袁颖;黄世峰;刘钉宾;陶昆;冯文莉
来源:中国肿瘤临床 2010 年 37卷 2期