目的:探讨PUMA基因转染是否增强乳腺癌MCF-7细胞对表柔比星致凋亡的敏感性.方法:应用脂质体介导重组真核表达载体PUMA-pCDNA3和空载体pCDNA3质粒瞬时转染至乳腺癌MCF-7细胞中,G418筛选阳性细胞.将系列浓度(0.01~100μmol/L)的表柔比星分别作用于 MCF-7、MCF-7/PUMA 和 MCF-7/ pCDNA3细胞72 h,MTT 法测定各组细胞的存活率并计算IC50,FCM、TUNEL法检测细胞凋亡情况,Western blotting检测各组细胞 PUMA蛋白表达的变化.结果:MCF-7、MCF-7/PUMA和MCF-7/pCDNA3细胞的表柔比星IC50分别为(13±1.4)、(1.8±0.2)和(10.7±1.3)μmol/L,MCF-7/PUMA细胞对表柔比星作用的敏感性增加了7.2倍.表柔比星以剂量依赖方式诱导 MCF-7细胞凋亡,但对 MCF-7/PUMA 细胞所诱导的凋亡比 MCF-7和 MCF-7 pCDNA3更明显.低浓度表柔比星(0.1μmol/L)轻微引起MCF-7/ pCDNA3[(1.15±0.26)
作者:姜真;孙长岗;庄静;刘瑞娟;王华庆;王兴;曲美婷
来源:中国肿瘤临床 2013 年 1期