目的:研究微小RNA-200a(miR-200a)对肺癌细胞增殖的影响,并探讨其分子机制.方法:采用Real-time PCR检测15例非小细胞肺癌组织和对应癌旁组织、人肺癌细胞株(A549、NCI-H520、SK-MES-1)及人正常肺支气管上皮细胞株16HBE中miR-200a的表达水平.用CCK-8法检测miR-200a对A549肺癌细胞增殖活性的影响.通过生物信息学方法预测miR-200a可能的靶基因,双荧光素酶报告基因实验结合Real-time PCR和Western blot验证miR-200a对靶基因YAP1的调控作用.CCK-8法检测下调靶基因YAP1对A549肺癌细胞株增殖活性的影响.结果:miR-200a在非小细胞肺癌组织和肺癌细胞系中表达明显降低(P<0.01).上调miR-200a表达后明显抑制A549肺癌细胞的增殖活力(P<0.01).双荧光素酶报告基因显示miR-200a可以直接作用于靶基因YAP1的3'-UTR区域抑制荧光素酶活性(P<0.01),Real-time PCR和Western blot检测显示上调miR-200a的表达能够明显下调A549肺癌细胞YAP1 mRNA和蛋白的表达水平(P<0.01).CCK-8法显示下调YAP1的表达能够明显抑制A549肺癌细胞的增殖活性(P<0.01).结论:miR-200a通过靶向作用于YAP1基因来抑制肺癌细胞的增殖,从而在肺癌中发挥抑癌基因的功能.
作者：许璐；方玉松；王丹云；王宗明；许鹏
来源：中国肿瘤临床 2017 年 44卷 7期
