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目的: 建立基因枪介导的基因转移系统,为基因修饰的肿瘤细胞疫苗研究奠定实验基础.方法: 采用基因枪转导的方法,将真核表达质粒(pcDNA3.1GM-CSF)转导入人胃癌细胞株(SGC),经G418筛选获得阳性克隆(SGC-GM-CSF),通过RT-PCR方法鉴定,重组载体已整合到胃癌细胞的基因组中.结果: SDS-PAGE和Western blot分析的SGC-GM-CSF上清液结果显示rhGM-CSF主带在30 kD左右,SGC-GM-CSF在体外长期培养中保持稳定分泌,分泌量达到24 h平均247 ng/106 cell.结论: 建立的基因枪介导的基因转移系统安全、有效,为应用于肿瘤基因治疗提供了实验基础.

作者:郑天荣;郑秋红;林贤东;谢云青;龚福生

来源:中国肿瘤生物治疗杂志 2002 年 9卷 3期

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作者:
郑天荣;郑秋红;林贤东;谢云青;龚福生
来源:
中国肿瘤生物治疗杂志 2002 年 9卷 3期
标签:
GM-CSF 基因枪 肿瘤疫苗 基因治疗
目的: 建立基因枪介导的基因转移系统,为基因修饰的肿瘤细胞疫苗研究奠定实验基础.方法: 采用基因枪转导的方法,将真核表达质粒(pcDNA3.1GM-CSF)转导入人胃癌细胞株(SGC),经G418筛选获得阳性克隆(SGC-GM-CSF),通过RT-PCR方法鉴定,重组载体已整合到胃癌细胞的基因组中.结果: SDS-PAGE和Western blot分析的SGC-GM-CSF上清液结果显示rhGM-CSF主带在30 kD左右,SGC-GM-CSF在体外长期培养中保持稳定分泌,分泌量达到24 h平均247 ng/106 cell.结论: 建立的基因枪介导的基因转移系统安全、有效,为应用于肿瘤基因治疗提供了实验基础.