目的: 构建死亡受体5(death receptor 5,DR5)胞外区域(eDR5)的表达载体,表达纯化重组蛋白并鉴定其生物特性.方法: 通过重叠 PCR 获得 DR5 胞外段编码序列,构建 pET-22b(+)/DR5 表达载体,转化大肠杆菌 BL21(DE3),IPTG 诱导表达,Ni2+柱亲和纯化,SDS-PAGE、直接 ELISA 鉴定纯化产物的纯度和特异性,用 MTT 法检测eDR5 蛋白阻断DR5 单克隆抗体 FMU1.5 和 TRAIL 诱导人胶质瘤细胞株 U343(高表达DR5)、U373(低表达DR5 )细胞凋亡的作用.结果: 获得了 DR5 胞外段编码序列,目的蛋白在上清及包涵体中都有表达, 表达量占菌体总蛋白的 30
作者：张长弓；宋玉国；李文珠；王莉；陈彩霞；庄国洪
来源：中国肿瘤生物治疗杂志 2006 年 13卷 6期
