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目的:研究以小鼠结肠癌细胞CT-26 RNA作为抗原体外转染经mIL-12基因修饰的树突状细胞(dendritic cells,DC),观察其诱导特异性抗肿瘤的效应. 方法:小鼠骨髓细胞体外以rmGM-CSF、rmIL-4诱导培养获取树突状细胞,流式细胞术检测纯度;293细胞扩增携带mIL-12基因的重组腺病毒,体外转染树突状细胞;Trizol法提取CT-26细胞总RNA,应用TransMessenger体外转染mIL-12基因修饰的树突状细胞,免疫接种小鼠. ELISA法检测细胞上清及小鼠血液中mIL-12水平,LDH释放法检测小鼠体内细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性.结果:小鼠骨髓细胞经诱导培养后,获得大量高纯度的树突状细胞,流式细胞术检测CD11c+的树突状细胞>90

作者:褚晓源;王杰军;陈龙邦;王靖华;管晓翔;耿怀成;张群;宋海珠;汪灏

来源:中国肿瘤生物治疗杂志 2007 年 14卷 1期

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作者:
褚晓源;王杰军;陈龙邦;王靖华;管晓翔;耿怀成;张群;宋海珠;汪灏
来源:
中国肿瘤生物治疗杂志 2007 年 14卷 1期
标签:
RNA 白细胞介素-12 树突状细胞 基因治疗 结肠癌 细胞毒性T淋巴细胞
目的:研究以小鼠结肠癌细胞CT-26 RNA作为抗原体外转染经mIL-12基因修饰的树突状细胞(dendritic cells,DC),观察其诱导特异性抗肿瘤的效应. 方法:小鼠骨髓细胞体外以rmGM-CSF、rmIL-4诱导培养获取树突状细胞,流式细胞术检测纯度;293细胞扩增携带mIL-12基因的重组腺病毒,体外转染树突状细胞;Trizol法提取CT-26细胞总RNA,应用TransMessenger体外转染mIL-12基因修饰的树突状细胞,免疫接种小鼠. ELISA法检测细胞上清及小鼠血液中mIL-12水平,LDH释放法检测小鼠体内细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性.结果:小鼠骨髓细胞经诱导培养后,获得大量高纯度的树突状细胞,流式细胞术检测CD11c+的树突状细胞>90