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目的:研究聚酰胺(polyamidoamine ,PAMAM)树形分子高聚合物作为survivin反义寡核苷酸(survivin antisense oligodeoxynucleotide,survivin-asODN)载体传递系统的可行性以及对肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响.方法:将200 μg/L survivin-asODN和3.66 μg/L PAMAM混合制备PAMAM反义基因复合物,同时制备阳离子脂质体反义基因复合物作为对照.透射电镜观察复合物的形态、粒径,Zeta电位分析仪测定复合物的zeta电位,离心法和紫外分光光度仪测定复合物的包封率、载药率和体外DNA释放速度.将上述两种基因载体复合物转染肝癌SMMC-7721细胞,测定其转染效率;Western blotting检测转染后肿瘤细胞中survivin蛋白的表达;流式细胞术检测肿瘤细胞的凋亡率.结果:成功制备PAMAM反义基因载体系统PAMAM-survivin-asODN.该复合物的粒径小于脂质体-survivin-asODN复合物的粒径[(64.9±9.60 )vs(193.9±32.20)nm,P<0.01],但zeta电位高于后者[(37.7±3.80 )vs(22.6±2.20)mV,P<0.05];两者基因载药率、包封率无显著差异;PAMAM反义基因复合物对DNA持续释放达14 d,但脂质体复合物只持续5 d.PAMAM-survivin-asODN 转染肝癌细胞的效果强于脂质体-survivin-asODN(P<0.05).转染后肝癌细胞siurvivin蛋白的表达显著低于脂质体复合物[(26.80±5.

作者:姚航;岳隧岩;金跃明;潘碧峰;高峰;崔大祥

来源:中国肿瘤生物治疗杂志 2007 年 14卷 6期

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作者:
姚航;岳隧岩;金跃明;潘碧峰;高峰;崔大祥
来源:
中国肿瘤生物治疗杂志 2007 年 14卷 6期
标签:
聚酰胺树形分子高聚合物 反义寡核苷酸 survivin基因 肝癌 凋亡
目的:研究聚酰胺(polyamidoamine ,PAMAM)树形分子高聚合物作为survivin反义寡核苷酸(survivin antisense oligodeoxynucleotide,survivin-asODN)载体传递系统的可行性以及对肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响.方法:将200 μg/L survivin-asODN和3.66 μg/L PAMAM混合制备PAMAM反义基因复合物,同时制备阳离子脂质体反义基因复合物作为对照.透射电镜观察复合物的形态、粒径,Zeta电位分析仪测定复合物的zeta电位,离心法和紫外分光光度仪测定复合物的包封率、载药率和体外DNA释放速度.将上述两种基因载体复合物转染肝癌SMMC-7721细胞,测定其转染效率;Western blotting检测转染后肿瘤细胞中survivin蛋白的表达;流式细胞术检测肿瘤细胞的凋亡率.结果:成功制备PAMAM反义基因载体系统PAMAM-survivin-asODN.该复合物的粒径小于脂质体-survivin-asODN复合物的粒径[(64.9±9.60 )vs(193.9±32.20)nm,P<0.01],但zeta电位高于后者[(37.7±3.80 )vs(22.6±2.20)mV,P<0.05];两者基因载药率、包封率无显著差异;PAMAM反义基因复合物对DNA持续释放达14 d,但脂质体复合物只持续5 d.PAMAM-survivin-asODN 转染肝癌细胞的效果强于脂质体-survivin-asODN(P<0.05).转染后肝癌细胞siurvivin蛋白的表达显著低于脂质体复合物[(26.80±5.