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目的:研究siRNA干扰鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制因子-1(ornithine decarboxylase antizyme inhibitor-1,OAZI-1)的表达对小鼠黑素瘤B16-F1细胞增殖的影响.方法:构建OAZI-1特异性siRNA表达质粒psilencer2.1-U6/OAZI-I及对照psilencer2.1-U6/scrambled质粒,脂质体转染法将质粒转染入B16-F1细胞,Western blotting和定量PCR检测B16-F1细胞中OAZI-1的表达.MTT法和流式细胞术检测psilencer2.1-U6/OAZI-1对B16-F1细胞增殖和细胞周期的影响;MTT法检测干扰OAZI-1表达后B16-F1细胞对抗肿瘤药物紫杉醇(docetaxel)的敏感性.结果:成功获得稳定转染psilencer2.1-U6/OAZI-1质粒的B16-F1细胞(B16/OAZI-1细胞),B16/OAZI-1细胞中OAZI-1 mRNA和蛋白表达分别为阴性对照B16/scrambled细胞的25.0%和18.9%.干扰OAZI-1的表达抑制B16-F1细胞的增殖,G0/G1期细胞比例增加[(57.0±0.8)% vs (63.5±0.7)%,P<0.01],而S期和G2/M期细胞比例减少[(31.5±0.7)% vs (27.5±0.3)%,P<0.05;(11.5±0.3)% vs (9.1±0.6)%,P<0.01].干扰OAZI-1的表达能降低B16-F1细胞对紫杉醇的敏感性.结论:siRNA干扰OAZI-1的表达能抑制黑素瘤B16-F1细胞的增殖,并降低其对紫杉醇的敏感性.

作者:何玲;韩钰;刘梦瑶;蔡富强;王艳林

来源:中国肿瘤生物治疗杂志 2011 年 18卷 4期

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作者:
何玲;韩钰;刘梦瑶;蔡富强;王艳林
来源:
中国肿瘤生物治疗杂志 2011 年 18卷 4期
标签:
鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制因子-1 RNA干扰技术 黑素瘤细胞
目的:研究siRNA干扰鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制因子-1(ornithine decarboxylase antizyme inhibitor-1,OAZI-1)的表达对小鼠黑素瘤B16-F1细胞增殖的影响.方法:构建OAZI-1特异性siRNA表达质粒psilencer2.1-U6/OAZI-I及对照psilencer2.1-U6/scrambled质粒,脂质体转染法将质粒转染入B16-F1细胞,Western blotting和定量PCR检测B16-F1细胞中OAZI-1的表达.MTT法和流式细胞术检测psilencer2.1-U6/OAZI-1对B16-F1细胞增殖和细胞周期的影响;MTT法检测干扰OAZI-1表达后B16-F1细胞对抗肿瘤药物紫杉醇(docetaxel)的敏感性.结果:成功获得稳定转染psilencer2.1-U6/OAZI-1质粒的B16-F1细胞(B16/OAZI-1细胞),B16/OAZI-1细胞中OAZI-1 mRNA和蛋白表达分别为阴性对照B16/scrambled细胞的25.0%和18.9%.干扰OAZI-1的表达抑制B16-F1细胞的增殖,G0/G1期细胞比例增加[(57.0±0.8)% vs (63.5±0.7)%,P<0.01],而S期和G2/M期细胞比例减少[(31.5±0.7)% vs (27.5±0.3)%,P<0.05;(11.5±0.3)% vs (9.1±0.6)%,P<0.01].干扰OAZI-1的表达能降低B16-F1细胞对紫杉醇的敏感性.结论:siRNA干扰OAZI-1的表达能抑制黑素瘤B16-F1细胞的增殖,并降低其对紫杉醇的敏感性.