目的:构建针对CIAPIN1基因的慢病毒siRNA表达载体并稳定转染人乳腺癌多柔比星耐药细胞MCF-7/ADM,观察该基因对乳腺癌细胞耐药性的影响.方法:设计合成针对CIAPIN1的siRNA重组质粒表达载体,并筛选出最有效的干扰序列,使用病毒包装系统进行慢病毒颗粒的包装和生产,获取ADM-CIAPIN1 RNAi稳定表达细胞株；MTT法检测CIAPIN1基因干扰前后细胞对于不同化疗药物IC50值的变化.结果:测序验证针对CIAPIN1的siRNA重组质粒构建成功,并筛选CLAPIN1-siRNA1为最佳干扰序列；以慢病毒为载体将干扰表达质粒稳定转染入乳腺癌细胞MCF-7/ADM后,抑制CIAPIN1表达水平超过88％.RNA干扰后紫杉醇、多柔比星及吉西他滨3种抗肿瘤药物对于MCF-7/ADM细胞的IC50值均显著下降[(7.12±0.31)、(11.21±1.79)、(49.72±4.52)vs(1.13±0.06)、(4.51 ±0.20)、(18.30±1.27) μg/ml,P＜0.01],说明该细胞的耐药性明显减弱.结论:针对CIAPIN1基因的慢病毒siRNA表达载体可以有效抑制MCF-7/ADM细胞中该基因的表达,CIAPIN1基因表达下调可使乳腺癌细胞的多药耐药性发生逆转.
作者：路丹；王文秀；高树建；信涛；邓立力；徐玉清
来源：中国肿瘤生物治疗杂志 2012 年 19卷 1期
