目的:探讨黑素瘤相关抗原-A9(melanoma-associated antigen,MAGE-A9)对人乳腺癌细胞中P53转录活性及功能的影响.方法:通过LipofectamineTM 2000体外转染质粒pcDNA3.0、pcDNA3.0-p53、pCMV6-MAGE-A9和pcDNA3.0-p53/MAGE-A9至人乳腺癌MDA-MB-231细胞,RT-PCR和Western blotting检测细胞中p21WAFI mRNA和蛋白的表达,荧光素酶报告基因分析检测细胞中p21WAFI启动子介导的荧光素酶表达活性,MTT法检测转染不同质粒对MDA-MB-231细胞增殖的影响.结果:转染pcDNA3.0-p53/MAGE-A9组MDA-MB-231细胞中p21WAFI mRNA和蛋白表达水平均明显低于pcDNA3.0-p53组[(0.15 ±0.01)vs (0.18 ±0.02),(0.03 ±0.00)vs(0.06±0.01);均P<0.05].转染pcDNA3.0-p53质粒可以增强MDA-MB-231细胞中p21WAFI启动子介导的荧光素酶的表达[(58.56±3.47) vs (1.00±0.12),P<0.01],转染pcDNA3.0-p53/MAGE-A9后,MDA-MB-231细胞中p21WAFI启动子介导的荧光素酶的表达较转染pcDNA3.0-p53组明显降低[(22.02±4.91)vs (58.56 ±3.47),P<0.05].与pcDNA3.0组相比,pcDNA3.0-p53组MDA-MB-231细胞增殖率明显明显降低[(228.89±22.39)%vs(337.23±23.67)%,P<0.05];而pcDNA3.0-p53/MAGE-A9组MDA-MB-231细胞增殖率明显高于pcDNA3.0-p53组[(291.51 ±5.91)
作者:吕伟华;桑梅香;王彬;于凡;单保恩
来源:中国肿瘤生物治疗杂志 2013 年 20卷 5期