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目的:探讨黑素瘤抗原(melanoma antigen gene,MAGE)-A11对雌激素受体(estrogen receptor,ER)介导的乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响.方法:利用RT-PCR及Western blotting筛选出ER表达阳性的人乳腺癌MCF-7细胞作为模式细胞,采用基因转染、RT-PCR和Western blotting检测MAGE-A11对17β-雌二醇(17β-E)诱导的ER下游靶基因Efp表达的影响,采用免疫共沉淀法检测MCF-7细胞中MAGE-A11和ER蛋白的相互作用,采用MTT法和克隆形成实验分别检测MAGE-A11及17β-E处理对MCF-7细胞生存率和细胞克隆形成数的影响.结果:ER阳性MCF-7细胞经17β-E处理24 h后,下游靶基因Efp的mRNA(2.97 ±0.16vs1.71 ±0.09,P<0.05)和蛋白表达水平显著升高(2.65 ±0.12 vs 0.92 ±0.06,P<0.05);转染MAGE-A11的MCF-7细胞经17β-E 24 h处理后,其Efp的mRNA(4.01 ±0.19 vs 2.97 ±0.16,P<0.05)及蛋白表达(3.52±0.15 vs 2.65 ±0.12,P<0.05)更显著增加.免疫共沉淀结果显示,外源性MAGE-A11与ER之间存在相互作用.MCF-7细胞经17β-E处理后细胞增殖率显著增加[(152±6.7)%vs(108±4.8%),P<0.05],转染MAGE-A11的MCF-7细胞经17β-E处理后细胞增殖率更显著增加[(181±8.6)%vs (152±6.7)%,P<0.05];17β-E处理后MCF-7细胞克隆形成数显著增多[(77±5) vs

作者:桑梅香;连易水;刘飞;谷丽娜;单保恩

来源:中国肿瘤生物治疗杂志 2015 年 22卷 5期

知识库介绍

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作者:
桑梅香;连易水;刘飞;谷丽娜;单保恩
来源:
中国肿瘤生物治疗杂志 2015 年 22卷 5期
标签:
乳腺癌 黑素瘤抗原A-11 雌激素受体 细胞增殖 breast cancer melanoma antigen gene-A11 (MAGE-A11) estrogen receptor (ER) cell proliferation
目的:探讨黑素瘤抗原(melanoma antigen gene,MAGE)-A11对雌激素受体(estrogen receptor,ER)介导的乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响.方法:利用RT-PCR及Western blotting筛选出ER表达阳性的人乳腺癌MCF-7细胞作为模式细胞,采用基因转染、RT-PCR和Western blotting检测MAGE-A11对17β-雌二醇(17β-E)诱导的ER下游靶基因Efp表达的影响,采用免疫共沉淀法检测MCF-7细胞中MAGE-A11和ER蛋白的相互作用,采用MTT法和克隆形成实验分别检测MAGE-A11及17β-E处理对MCF-7细胞生存率和细胞克隆形成数的影响.结果:ER阳性MCF-7细胞经17β-E处理24 h后,下游靶基因Efp的mRNA(2.97 ±0.16vs1.71 ±0.09,P<0.05)和蛋白表达水平显著升高(2.65 ±0.12 vs 0.92 ±0.06,P<0.05);转染MAGE-A11的MCF-7细胞经17β-E 24 h处理后,其Efp的mRNA(4.01 ±0.19 vs 2.97 ±0.16,P<0.05)及蛋白表达(3.52±0.15 vs 2.65 ±0.12,P<0.05)更显著增加.免疫共沉淀结果显示,外源性MAGE-A11与ER之间存在相互作用.MCF-7细胞经17β-E处理后细胞增殖率显著增加[(152±6.7)%vs(108±4.8%),P<0.05],转染MAGE-A11的MCF-7细胞经17β-E处理后细胞增殖率更显著增加[(181±8.6)%vs (152±6.7)%,P<0.05];17β-E处理后MCF-7细胞克隆形成数显著增多[(77±5) vs