目的:探讨电转法沉默ATP结合盒转运子E1(ATP-binding cassette protein E1,ABCE1)基因的表达对人食管癌EC109细胞凋亡、增殖、侵袭及迁移的影响.方法:合成靶向ABCE1的siRNA序列(ABCE1-siRNA)以及阴性对照序列(NC-siRNA),电转法转染至EC109细胞,分别形成ABCE1-EC109、NC-siRNA-EC109细胞.RT-PCR、Western blotting检测转染后EC109细胞中ABCE1 mRNA与蛋白的表达情况,流式细胞术检测EC109细胞周期及凋亡,CCK-8法、划痕愈合实验、Transwell 法分别检测EC109细胞的增殖、迁移以及侵袭的能力.结果:ABCEl-EC109细胞中ABCE1 mRNA和蛋白表达较NC-siRNA-EC109细胞明显降低[(0.47 ±0.04) vs (0.67 ±0.05),(0.63 ±0.09) vs (0.86 ±0.11);均P<0.05].与NC-siRNA-EC109细胞相比,ABCE1-EC109细胞的增殖速度明显减慢[(2.20 ±0.10) vs (2.91 ±0.13),P<0.05],细胞周期阻滞在G0/G1期细胞数目明显增多[(76.5±3.1)%vs(56.1±2.7)%,P<0.05)];细胞的凋亡率明显升高[(15.46 ±3.12)%vs(0.54±0.24)%,P<0.01],迁移、侵袭能力均显著下降[迁移:(8.12 ±0.23)vs(1.91 ±0.11) μm,P<0.05;侵袭:(42.56 ±4.68) vs(68.78 ±6.98)个,P<0.01].结论:电转法沉默ABCE1基因的表达可促进食管癌EC109细胞的凋亡,抑制其体外增
作者:李小瑞;岳军艳;张清琴;崔艳慧;花勤亮;寇小格;李慧敏
来源:中国肿瘤生物治疗杂志 2013 年 20卷 5期