目的:建立一种荧光可视化显像且稳定过表达缺氧诱导因子-1 α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)的裸鼠结直肠癌移植瘤模型.方法:对不同的人结直癌细胞系(SW480、SW620、LOVO及HCT116细胞)用缺氧诱导剂CoCl2处理,根据HIF-1α被诱导表达的情况选择合适的靶细胞;将HIF-1α的cDNA序列克隆至慢病毒表达质粒pLV-TRC-EGFP,构建pLV-HIF1 α-EGFP慢病毒表达质粒,并包装过表达HIF-1α的慢病毒颗粒Lenti-HIF1 α-EGFP.将Lenti-HIF1 α-EGFP感染SW480细胞,嘌呤霉素筛选稳定过表达HIF-1α的细胞株SW480HIF-1 α,Western blotting检测SW480HIF-1仪细胞内HIF-1α及其下游蛋白VEGF、M1型丙酮酸激酶(pyruvate kinase expression M1,PKM1)的表达情况,Transwell实验检测其迁移能力.裸鼠腹腔注射SW480HIF-1n建立结直肠癌移植瘤模型,倒置荧光显微镜观察裸鼠腹腔移植瘤结节.结果:常氧条件下4种结直肠癌细胞均不表达HIF-1α,经CoCl2诱导后,除SW480细胞系以外的细胞均可被诱导表达HIF-1α,故选择SW480细胞作为研究靶细胞.成功构建稳定过表达HIF-1α的细胞株SW480HIF-1d,SW480HIF-1α细胞内HIF-1 α、VEGF和PKM1的表达水平均高于野生型SW480细胞,其迁移能力较野生型SW480细胞显著增强[观察视野内迁移细胞数:(250±11)vs(50±

作者：李喆；叶小磊；杨生生；殷佩浩；胡送娇；陈磊；房林

来源：中国肿瘤生物治疗杂志 2015 年 22卷 2期