目的:探讨下调中介体(mediator,Med) 19表达是否增加紫杉醇(pacliatxel,PTX)对p53野生型和突变型乳腺癌细胞化疗的疗效.方法:构建Med19 RNA干扰(RNAi)慢病毒,分别感染p53野生型的乳腺癌细胞MCF-7和53突变型的乳腺癌细胞MDA-MB-231,两种细胞均分为Med19基因敲减组(KD组:细胞感染pGcscil-Med19-siRNA-GFP)、空载体感染组(NC组:细胞感染pGcscil-Med19-NC-GFP)、对照组(CON组:未感染慢病毒的乳腺癌细胞),荧光显微镜观察慢病毒感染效率.Western blotting检测Med19基因沉默后各组细胞内P53、磷酸化P53(pP53)、P21蛋白表达水平的变化.紫杉醇分别作用于Med19基因沉默前后的MCF-7和MDA-MB-231细胞,MTF法检测细胞增殖抑制率的变化,流式细胞术检测细胞周期和凋亡率的变化.结果:KD组和NC组细胞的荧光感染效率均大于90%,表明获得了满意的感染效率.与CON组和NC组相比,两种细胞KD组的Med19蛋白表达水平均下降,差异有统计学意义(均P<0.05).MCF-7细胞KD组P53、pP53、P21蛋白表达上调,差异有统计意义(均P <0.05).在0.01~ 50 μg/ml范围内,紫杉醇抑制两种乳腺癌细胞的生长增殖并呈浓度依赖性(P<0.05),对KD组的抑制率和细胞凋亡率均高于NC组及CON组,差异有统计学意义(均P<0.05);但MDA-MB-231细胞各组间抑制率差异无统计
作者:杨晓丹;郭子健;刘贝贝;李莉华
来源:中国肿瘤生物治疗杂志 2015 年 22卷 6期