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目的:研究5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)在卵巢癌细胞系SKOV3中对核苷酸切除交叉修复互补基因1(exeision repair cross complementation group 1,ERCC1)表达的影响及可能的机制.方法:设计特异性针对DNA甲基转移酶1(DNAmethyhransferase 1,DNMT1)基因的shRNA转染人人卵巢癌细胞系SKOV3细胞中,Western blotting检测SKOV3细胞DNMT1以及ERCC1的表达变化;利用不同浓度5-Aza-CdR于不同时间点处理卵巢癌SKOV3细胞,Western blotting检测DNMTI和ERCC1蛋白在处理前后的变化,利用亚硫酸氢钠法检测ERCC1基因启动子区域甲基化水平.结果:0.5、1.0、2.0、4.0μmol/L的5-Aza-CdR作用于SKOV3细胞后,DNMT1表达水平呈浓度依赖性降低,而ERCC1表达水平呈浓度依赖性升高;使用终浓度为1.0 μmol/L的5-Aza-CdR处理SKOV3细胞12、24、36 h后,DNMT1表达水平呈时间依赖性降低,而ERCC1表达水平呈时间依赖性升高,亚硫酸氢钠法检测示药物处理前ERCC1启动子区域处于高甲基化水平,在用1.0μmol/L的5-Aza-CdR处理后,其启动子发生了去甲基化.结论:5-Aza-CdR通过DNMT1调控卵巢癌SKOV3细胞中ERCC1基因的甲基化及其表达水平.

作者:陈慧雁;李晓翠;沈宗姬

来源:中国肿瘤生物治疗杂志 2017 年 24卷 6期

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作者:
陈慧雁;李晓翠;沈宗姬
来源:
中国肿瘤生物治疗杂志 2017 年 24卷 6期
标签:
卵巢癌 甲基化 DNA甲基转移酶1基因 切除交叉修复互补基因1 ovarian cancer methylation DNA methyltransferase 1 (DNMT1) excision repair cross complementation group 1 (ERCC1)
目的:研究5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)在卵巢癌细胞系SKOV3中对核苷酸切除交叉修复互补基因1(exeision repair cross complementation group 1,ERCC1)表达的影响及可能的机制.方法:设计特异性针对DNA甲基转移酶1(DNAmethyhransferase 1,DNMT1)基因的shRNA转染人人卵巢癌细胞系SKOV3细胞中,Western blotting检测SKOV3细胞DNMT1以及ERCC1的表达变化;利用不同浓度5-Aza-CdR于不同时间点处理卵巢癌SKOV3细胞,Western blotting检测DNMTI和ERCC1蛋白在处理前后的变化,利用亚硫酸氢钠法检测ERCC1基因启动子区域甲基化水平.结果:0.5、1.0、2.0、4.0μmol/L的5-Aza-CdR作用于SKOV3细胞后,DNMT1表达水平呈浓度依赖性降低,而ERCC1表达水平呈浓度依赖性升高;使用终浓度为1.0 μmol/L的5-Aza-CdR处理SKOV3细胞12、24、36 h后,DNMT1表达水平呈时间依赖性降低,而ERCC1表达水平呈时间依赖性升高,亚硫酸氢钠法检测示药物处理前ERCC1启动子区域处于高甲基化水平,在用1.0μmol/L的5-Aza-CdR处理后,其启动子发生了去甲基化.结论:5-Aza-CdR通过DNMT1调控卵巢癌SKOV3细胞中ERCC1基因的甲基化及其表达水平.