目的:探讨miR-126-5p对结肠癌SW480细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及其作用机制.方法:用miR-126 mimic和pcDNA Notch2 (pc-Notch2) 等分别或同时转染结肠癌SW480细胞, 用qPCR法检测miR-126-5p和Notch2的表达;荧光素酶报告实验观察miR-126-5p和Notch2的靶向关系;CCK-8法、划痕愈合实验、Transwell小室法和Annexin V/PI染色流式细胞术分别检测转染细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡, Western blotting检测Notch2、增殖细胞核抗原 (proliferating cell nuclear antigen, PCNA) 、cleaved Caspase-3、MMP-2和MMP-9的表达.结果:转染miR-126 mimic能显著升高SW480细胞miR-126-5p的表达水平 (P<0.01) 和显著抑制SW480细胞Notch2的表达 (P<0.01), 同时证实Notch2上存在miR-126-5p的结合位点.上调miR-126-5p显著抑制SW480细胞增殖并降低PCNA的表达水平 (P<0.01) 、升高细胞凋亡率和cleaved Caspase-9的表达水平 (均P<0.01), pc-Notch2显著减弱miR-126 mimic对SW480细胞增殖和凋亡的调控作用;miR-126 mimic显著降低SW480细胞划痕愈合率和穿膜细胞数 (均P<0.01) 、抑制MMP-2和MMP-9的表达 (P<0.01);pc-Notch2显著减弱miR-126 mimic对SW480细胞迁移、侵袭及MMP-2、MMP-9表达的抑制作用 (均P<0.01) .结论:miR-126-5p通
作者:王艳良;陈涛
来源:中国肿瘤生物治疗杂志 2018 年 25卷 10期