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目的:探讨下调miR-221对慢性粒细胞白血病(CML)K562细胞增殖和凋亡的影响及其相关的调控机制.方法:将K562细胞分为对照组、miRNA阴性对照(miR-NC)组、miR-221 inhibitor组、miR-221 inhibitor+阴性对照siRNA(NC siRNA)组和miR-221 inhibitor+SOCS3 siRNA组.其中,对照组细胞不进行另外处理;miR-NC组和miR-221 inhibitor组分别采用miR-NC和miR-221 inhibitor转染至细胞;miR-221 inhibitor+NC siRNA组和miR-221 inhibitor+SOCS3 siRNA组采用已稳定转染miR-221inhibitor的细胞再分别转染NC siRNA和SOCS3 siRNA.用qPCR鉴定miR-221 inhibitor的转染效率,CCK-8法检测各组细胞的增殖活性,AnnexinV-FITC/PI双染色流式术检测各组细胞的凋亡水平,WB实验检测各组细胞的SOCS3、p-JAK1、p-JAK2、p-STAT3和survivin的蛋白表达水平.结果:与对照组比较,miR-221 inhibitor组细胞内miR-221的表达显著下调(P<0.01),细胞增殖活性在转染后48、72 h时明显降低(P<0.05或P<0.01),凋亡细胞数量明显增加(P<0.01),细胞内SOCS3的表达水平明显增加(P<0.01),而p-JAK1、p-JAK2、p-STAT3和survivin的表达水平均明显降低(均P<0.01).与miR-221 inhibitor组比较,miR-221 inhibitor+SOCS3 siRNA组细胞增殖活性在转染后24、48和72 h时明显

作者:于游游;李彬;闫婷;张长庚

来源:中国肿瘤生物治疗杂志 2019 年 26卷 12期

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作者:
于游游;李彬;闫婷;张长庚
来源:
中国肿瘤生物治疗杂志 2019 年 26卷 12期
标签:
miR-221 慢性粒细胞白血病 凋亡 增殖 JAK-STAT信号通路
目的:探讨下调miR-221对慢性粒细胞白血病(CML)K562细胞增殖和凋亡的影响及其相关的调控机制.方法:将K562细胞分为对照组、miRNA阴性对照(miR-NC)组、miR-221 inhibitor组、miR-221 inhibitor+阴性对照siRNA(NC siRNA)组和miR-221 inhibitor+SOCS3 siRNA组.其中,对照组细胞不进行另外处理;miR-NC组和miR-221 inhibitor组分别采用miR-NC和miR-221 inhibitor转染至细胞;miR-221 inhibitor+NC siRNA组和miR-221 inhibitor+SOCS3 siRNA组采用已稳定转染miR-221inhibitor的细胞再分别转染NC siRNA和SOCS3 siRNA.用qPCR鉴定miR-221 inhibitor的转染效率,CCK-8法检测各组细胞的增殖活性,AnnexinV-FITC/PI双染色流式术检测各组细胞的凋亡水平,WB实验检测各组细胞的SOCS3、p-JAK1、p-JAK2、p-STAT3和survivin的蛋白表达水平.结果:与对照组比较,miR-221 inhibitor组细胞内miR-221的表达显著下调(P<0.01),细胞增殖活性在转染后48、72 h时明显降低(P<0.05或P<0.01),凋亡细胞数量明显增加(P<0.01),细胞内SOCS3的表达水平明显增加(P<0.01),而p-JAK1、p-JAK2、p-STAT3和survivin的表达水平均明显降低(均P<0.01).与miR-221 inhibitor组比较,miR-221 inhibitor+SOCS3 siRNA组细胞增殖活性在转染后24、48和72 h时明显