目的:探索抗HSP90单克隆抗体28C10通过靶向肿瘤干细胞促进顺铂(cisplatin,DDP)对人胃癌细胞PAMC82恶性生物学行为的抑制效果及其可能的作用机制.方法:28C10单独或与DDP联合处理人胃癌细胞PAMC82,采用不同实验方法检测该细胞的无血清成球能力、迁移和侵袭能力与克隆形成能力,CCK-8法检测28C10对PAMC82细胞恶性生物学行为和协同DDP抗癌能力的影响.采用细胞免疫荧光及流式细胞术检测PAMC82细胞中HSP90及eHSP90(extracellular HSP90)的表达、定位、eHSP90+亚群比例,以及28C10处理后对ALDH+、CD44+、eHSP90+细胞亚群的影响.采用WB实验检测28C10作用后PAMC82细胞中HSP90、干性相关蛋白以及PI3K/AKT/mTOR信号通路蛋白表达的变化.结果:胃癌细胞PAMC82膜表面表达eHSP90,具有2％～3％的eHSP90+细胞亚群,且eHSP90+细胞多为与ALDH+或CD44+共阳性细胞.28C10处理能显著抑制PAMC82细胞的成球、克隆形成、增殖、耐药、迁移及侵袭能力,而且和DDP联用的效果更明显(P＜0.05或P＜0.01).流式细胞术分析发现28C10处理显著抑制PAMC82细胞的eHSP90+、ALDH+和CD44+亚群数量(均P＜0.01).免疫荧光实验发现28C10作用后eHSP90发生内吞,WB实验结果显示eHSP90、CD44、ALDH和干性相关蛋白OCT4、SOX2表达量均降低(P＜0.05或P＜0.01).结论:

作者：孙新；张蕙雯；孙立新；刘军；遇珑；孙力超；冉宇靓

来源：中国肿瘤生物治疗杂志 2022 年 29卷 4期