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目的 观察N-乙酰半胱氨酸(NAC)对醋酸铅致人肾小管上皮细胞系(HK-2)损伤过程中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)表达的影响,并探讨其机制.方法 将体外培养至少2~5代对数生长期的HK-2细胞分为空白对照组;醋酸铅刺激组(分别用5、50 μmol/L刺激以确定最佳刺激浓度);NAC预处理组(用5 μmol/L NAC预处理2h后加入50μmol/L醋酸铅).采用CCK-8法检测HK-2的增殖能力,用流式细胞术检测HK-2的细胞周期,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清液中NGAL水平,用流式细胞术检测细胞活性氧(ROS)含量.结果 各浓度醋酸铅刺激后6、12、24、48 h HK-2的增殖能力[吸光度(A)值]均较空白对照组显著降低,且以50 μmol/L醋酸铅刺激组降低更显著(6h为0.53±0.02比0.64±0.02,12h为0.46±0.02比0.65±0.02,24h为0.35±0.02比0.68±0.02,48 h为0.26±0.02比0.74±0.02,均P< 0.05),12和24 h HK-2的细胞周期均呈现G0/1期阻滞[5μmol/L醋酸铅刺激组12h为(56.2±1.2)%,24 h为(60.6±0.7)%;50 mol/L醋酸铅刺激组12 h为(71.2±2.0)%,24 h为(79.6±2.8)%];刺激12、24、48、72 h各浓度醋酸铅组HK-2上清液中NGAL含量均较空白对照组明显增加,以50 μmol/L醋酸铅刺激组刺激72 h增加更显著(μ.g/L:1.212±0.015比0.749±0.040,P<0.

作者:周蓉;徐雅虹;陈闽东;沈杰;冯雪芳;陈希

来源:中国中西医结合急救杂志 2016 年 23卷 1期

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作者:
周蓉;徐雅虹;陈闽东;沈杰;冯雪芳;陈希
来源:
中国中西医结合急救杂志 2016 年 23卷 1期
标签:
醋酸铅 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白 肾小管上皮细胞 N-乙酰半胱氨酸 Lead acetate Neutrophil gelatinase-associated lipocalin Kidney epithelial cell N-acetylcysteine
目的 观察N-乙酰半胱氨酸(NAC)对醋酸铅致人肾小管上皮细胞系(HK-2)损伤过程中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)表达的影响,并探讨其机制.方法 将体外培养至少2~5代对数生长期的HK-2细胞分为空白对照组;醋酸铅刺激组(分别用5、50 μmol/L刺激以确定最佳刺激浓度);NAC预处理组(用5 μmol/L NAC预处理2h后加入50μmol/L醋酸铅).采用CCK-8法检测HK-2的增殖能力,用流式细胞术检测HK-2的细胞周期,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清液中NGAL水平,用流式细胞术检测细胞活性氧(ROS)含量.结果 各浓度醋酸铅刺激后6、12、24、48 h HK-2的增殖能力[吸光度(A)值]均较空白对照组显著降低,且以50 μmol/L醋酸铅刺激组降低更显著(6h为0.53±0.02比0.64±0.02,12h为0.46±0.02比0.65±0.02,24h为0.35±0.02比0.68±0.02,48 h为0.26±0.02比0.74±0.02,均P< 0.05),12和24 h HK-2的细胞周期均呈现G0/1期阻滞[5μmol/L醋酸铅刺激组12h为(56.2±1.2)%,24 h为(60.6±0.7)%;50 mol/L醋酸铅刺激组12 h为(71.2±2.0)%,24 h为(79.6±2.8)%];刺激12、24、48、72 h各浓度醋酸铅组HK-2上清液中NGAL含量均较空白对照组明显增加,以50 μmol/L醋酸铅刺激组刺激72 h增加更显著(μ.g/L:1.212±0.015比0.749±0.040,P<0.